DTPA anhydride

08 ラベル化剤

DTPA anhydride

• ラベル化剤

キレート標(biāo)識試薬

• 製品コード
  D033　 DTPA anhydride
• CAS番號
  23911-26-4
• 化學(xué)名
  Diethylenetriamine-N,N,N’,N",N"-pentaacetic acid, dianhydride
• 分子式?分子量
  C₁₄H₁₉N₃O₈=357.32

• ご購入方法
• お問い合わせ

D-Luciferin K salt

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

D-Luciferin K salt

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

分析用試薬: ルシフェラーゼ用基質(zhì)

• 製品コード
  L226　 D-Luciferin K salt
• CAS番號
  115144-35-9
• 化學(xué)名
  (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid, monopotassium salt
• 分子式?分子量
  C₁₁H₇N₂O₃S₂K=318.42

• ご購入方法
• お問い合わせ

SPDP

08 ラベル化剤

09 二価性試薬

SPDP

• ラベル化剤
• 二価性試薬

架橋剤

• 製品コード
  S291　 SPDP
• CAS番號
  68181-17-9
• 化學(xué)名
  N-Succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionate
• 分子式?分子量
  C₁₂H₁₂N₂O₄S₂=312.37

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

β-Mercaptopropionic acid

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

β-Mercaptopropionic acid

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

分析用試薬: マスキング剤

• 製品コード
  M002　 β-Mercaptopropionic acid
• CAS番號
  107-96-0
• 化學(xué)名
  3-Mercaptopropionic acid
• 分子式?分子量
  C₃H₆O₂S=106.14

• ご購入方法
• お問い合わせ

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

• ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Green

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX01　 ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

技術(shù)情報

技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足

• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

 

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

 

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件

Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか？

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

1H-Tetrazole

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

1H-Tetrazole

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

縮合剤（Coupling Reagents）

• 製品コード
  NX07　 1H-Tetrazole
• CAS番號
  288-94-8
• 化學(xué)名
  1H-Tetrazole
• 分子式?分子量
  CH₂N₄=70.05

• ご購入方法
• お問い合わせ

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

• ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Red

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX02　 ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

技術(shù)情報

技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足

• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

 

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件

Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか？

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

HOBt anhydrous

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

HOBt anhydrous

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

縮合反応補(bǔ)助剤

• 製品コード
  NX26　 HOBt anhydrous
• CAS番號
  2592-95-2
• 化學(xué)名
  1-Hydroxy-1H-benzotriazole
• 分子式?分子量
  C₆H₅N₃O=135.12

• ご購入方法
• お問い合わせ

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

• ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Deep Red

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX03　 ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

技術(shù)情報

技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足

• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件

Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

2-PDS

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

2-PDS

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

分析用試薬: 生體內(nèi)SH 基の比色定量試薬

• 製品コード
  P016　 2-PDS
• CAS番號
  2127-03-9
• 化學(xué)名
  2,2′-Dithiodipyridine
• 分子式?分子量
  C₁₀H₈N₂S₂=220.32

• ご購入方法
• お問い合わせ

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

• ラベル化剤

エクソソーム タンパク質(zhì)蛍光染色キット Green

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX04　 ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

技術(shù)情報

このキットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標(biāo)識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標(biāo)識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標(biāo)識エクソソームを調(diào)製できます。

 

精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従來から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

	回収率※
フィルトレーションチューブ(本キット)	50% 程度
ゲルろ過法	10% 程度
※ 小社での実施例：精製前後のエクソソーム粒子數(shù)をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認(rèn)の蛍光畫像をよくある質(zhì)問：標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？に掲載しています。

技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足

• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

 

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件
　Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
　Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
　Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

4-PDS

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

4-PDS

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

分析用試薬: SH基の比色定量試薬

• 製品コード
  P017　 4-PDS
• CAS番號
  2645-22-9
• 化學(xué)名
  4,4′-Dithiodipyridine
• 分子式?分子量
  C₁₀H₈N₂S₂=220.32

• ご購入方法
• お問い合わせ

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red

• ラベル化剤

エクソソーム タンパク質(zhì)蛍光染色キット Red

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX05　 ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

技術(shù)情報

このキットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標(biāo)識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標(biāo)識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標(biāo)識エクソソームを調(diào)製できます。

 

精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従來から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

	回収率※
フィルトレーションチューブ(本キット)	50% 程度
ゲルろ過法	10% 程度
※ 小社での実施例：精製前後のエクソソーム粒子數(shù)をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認(rèn)の蛍光畫像をよくある質(zhì)問：標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？に掲載しています。

技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足

• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

 

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件
　Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
　Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
　Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm
 

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

-Proteostain-Protein Quantification Kit-Rapid

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

-Proteostain-Protein Quantification Kit-Rapid

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

タンパク質(zhì)定量キット

• 製品コード
  PQ01　 -Proteostain-Protein Quantification Kit-Rapid

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

Q

たんぱく質(zhì)の定量範(fàn)囲

A

それぞれBSA換算で

Protein Quantification Kit-Rapidはstandard法で10 μg/mL～2000 μg/mLmicro法で1 μg/mL～50 μg/mLです。

Protein Quantification Kit-Wide rangeは100 μg/mL～5000 μg/mLになります。

Q

測定原理を教えて

A

RapidはBradford法を採用しています。

Coomassie Brilliant Blue G (CBB) をタンパク質(zhì)検出試薬として用いており、高感度で反応が早いという特長を持っています。
Coomassie Brilliant Blue G はタンパク質(zhì)に作用し、酸性條件で青色に呈色します。（λmax= 595 nm付近）

しかも呈色反応は1分以內(nèi)に終了し、生じた色素は30分以上安定です。
この方法を使うことにより數(shù)分程度でタンパク質(zhì)の定量を行うことが出來ます。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red

• ラベル化剤

エクソソーム タンパク質(zhì)蛍光染色キット Deep Red

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX06　 ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

技術(shù)情報

このキットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで

ExoSparkler シリーズは、エクソソームの標(biāo)識に最適化したプロトコルに加え、蛍光標(biāo)識後の未反応色素を除去できるフィルトレーションチューブを同梱しているため、簡単な操作で蛍光標(biāo)識エクソソームを調(diào)製できます。

 

精製手法(未反応色素の除去)の比較

ExoSparklarシリーズで未反応色素の除去に使用しているフィルトレーションチューブは、同用途で従來から用いられているゲルろ過法と比較して、高い回収率でエクソソームを精製することが可能です。

	回収率※
フィルトレーションチューブ(本キット)	50% 程度
ゲルろ過法	10% 程度
※ 小社での実施例：精製前後のエクソソーム粒子數(shù)をNTA(ナノ粒子トラッキング解析)で比較

フィルトレーションチューブを用いた精製の有効性確認(rèn)の蛍光畫像をよくある質(zhì)問：標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？に掲載しています。

技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足

• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

 

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10 µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件
　Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
　Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
　Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

WSC

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

WSC

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

ペプチド合成の縮合剤

• 製品コード
  W001　 WSC
• CAS番號
  25952-53-8
• 化學(xué)名
  1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide, hydrochloride
• 分子式?分子量
  C₈H₁₈ClN₃=191.70

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ExoIsolator Exosome Isolation Kit

08 ラベル化剤

ExoIsolator Exosome Isolation Kit

• ラベル化剤
• 細(xì)胞機(jī)能解析

エクソソーム精製キット

• テクニック不要の操作性
• 超遠(yuǎn)心法と同等の回収実績
• フィルターホルダーは再使用可能

• 製品コード
  EX10　 ExoIsolator Exosome Isolation Kit

本製品は現(xiàn)在、特別価格(30% off)にてキャンペーン中です！
ご要望の方はこちらよりお申込みください。
ご購入に際してはページ下部の本製品のキット內(nèi)容についての項をご確認(rèn)ください。

• ご購入方法
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マニュアル

Q

エクソソームがうまく回収できません。どのような原因が考えられますか。

A

以下の3つが原因として考えられますので、ご確認(rèn)ください。

１．ろ過の際、減圧度が強(qiáng)すぎるとエクソソームの回収量が著しく減少いたします。推奨減圧度である-25 kPa またはそれよりも弱い減圧度でろ過を行ってください。
２．Isolation Filter には表裏があり、間違って表裏を逆転させてフィルターを使用するとエクソソームの回収率が低下します。Isolation Filer の表(光沢のある面)を上にしてご使用ください。詳細(xì)は取扱説明書および使用方法の動畫をご覧ください。
３．Isolation Filter にトラップされたエクソソームを全て回収するためには、フィルター全體にPBSを萬遍なくかけて回収する必要があります。こちらも、取扱説明書および使用方法の動畫をご覧ください。

Q

回収したエクソソームは保存できますか。

A

4℃にて1ヶ月から半年間保存できます。長期間保存する場合は、-80℃で保管してください。ただし、凍結(jié)融解を極力避けるため、小分けし保存して下さい。

引用：吉岡　祐亮、落谷　孝広(2020)、エクソソーム実験ガイド　ISBN: 978-4-7581-2246-7

Q

血清含有培地で培養(yǎng)した細(xì)胞の培養(yǎng)上清からエクソソームを回収できますか。

A

血清含有培地の使用は推奨いたしません。細(xì)胞培養(yǎng)で使用される血清(FBS 等)にもエクソソームが含まれているため、血清を含む細(xì)胞培養(yǎng)上清から回収したエクソソームには血清由來のエクソソームも含有されてしまい、実験結(jié)果に影響を及ぼす可能性が考えられます。

Q

ExoIsolator でのエクソソームの回収率を教えてください。

A

サンプルによって回収率が変動する可能性がございます。
一例として、市販のウシ生乳由來エクソソームをExoIsolator で再精製して回収率を測定した実績を下記に示します。

タンパク質(zhì)回収率 (%)	粒子回収率 (%)
34.6 (SD±3.9)	38.3 (SD±8.3)

※タンパク質(zhì)量はBCA法、粒子數(shù)はナノ粒子トラッキング解析にて測定しています。

Q

培養(yǎng)上清からどのぐらいの量のエクソソームがとれますか。

A

細(xì)胞種により分泌されるエクソソーム量が異なりますので、回収できるエクソソーム量も細(xì)胞種や培養(yǎng)方法により異なります。一例として、HEK293S細(xì)胞(振盪培養(yǎng)にて培養(yǎng))の培養(yǎng)上清 25 ml からのエクソソームを回収した実績をご紹介します。

回収タンパク質(zhì)量 (μg)	回収粒子數(shù) (particles)
11.2 (SD±2.09)	6.0E+09 (SD±1.0E+9)

※タンパク質(zhì)量はBCA法、粒子數(shù)はナノ粒子トラッキング解析にて測定しました。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

Zephiramine

19 その他の生化學(xué)、分析用試薬

Zephiramine

• その他の生化學(xué)、分析用試薬

カリウム定量、金屬抽出比色定量等の添加用助剤

• 製品コード
  Z001　 Zephiramine
• CAS番號
  147228-81-7
• 化學(xué)名
  Benzyldimethyltetradecylammonium chloride, dihydrate
• 分子式?分子量
  C₂₃H₄₂ClN?2H₂O=404.07

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ExoIsolator Isolation Filter

08 ラベル化剤

ExoIsolator Isolation Filter

• ラベル化剤
• 細(xì)胞機(jī)能解析

エクソソーム精製キット用フィルター

• Filter Holderに対応したIsolation Filterを別売り
• 大容量(10枚)で購入可能

• 製品コード
  EX11　 ExoIsolator Isolation Filter

【30% Offキャンペーン実施中】
現(xiàn)在、特別価格(30% off)でのキャンペーン中です！ご要望の方はこちらよりお申込みください。

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この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

11-Amino-1-undecanethiol, hydrochloride

20 機(jī)能性有機(jī)材料

11-Amino-1-undecanethiol, hydrochloride

• 機(jī)能性有機(jī)材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬

• 製品コード
  A423　 11-Amino-1-undecanethiol, hydrochloride
• CAS番號
  143339-58-6
• 化學(xué)名
  11-Amino-1-undecanethiol, hydrochloride
• 分子式?分子量
  C₁₁H₂₆ClNS=239.85

• ご購入方法
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マニュアル

Q

SAMsとはどのようなものですか？

A

固體表面に種々の分子が自発的に高密度?高配向な分子膜を
形成することを自己組織化(Self-assemble:SA)といい、
形成された分子膜を自己組織化単分子膜(Self-Assembled Monolayers:SAMs)
といいます。

Q

SAMsを形成するための基板の浸漬條件を教えてください。

A

溶媒や濃度、および浸漬時間に制限はありませんが、
條件により膜の配向や密度に影響を與えます。
目的に応じて調(diào)整、検討を行ってください。
下記にこれまで報告されている浸漬條件の一例を示します。

(1)溶媒
　チオール類が溶解し、それらと化學(xué)反応しないものが使用可能です。
　エタノールを使用した報告例が比較的多くみられます。
　必要に応じて蒸留したものや、溶液中の溶存酸素を除去するために
　不活性ガス(窒素ガスまたはアルゴンガス）でバブリングしたものを
　使用します。
　また、末端NHSエステル型などは、アルコール類やアミン類および
　チオール類と反応する恐れがあり、溶媒中の水で分解する恐れも
　ありますので、脫水した溶媒を使用するなど、試薬によっては
　使用時に注意が必要な場合があります。

(2)溶液安定性
　溶媒中の溶存酸素によるチオールからジスルフィドへの酸化や
　水分による分解が考えられるため、溶液の用時調(diào)整をお勧めします。
　チオール溶液保存中に生成する副生成物は主にジスルフィドです。

(3)濃度
　數(shù)μ～數(shù)10 μmol/Lで一般的に行われています。

(4)浸漬時間
　數(shù)10分～數(shù)時間。
　濃度にもよりますが、チオール類の吸著は比較的短時間でもかなり飽和吸著に
　近い形で吸著しますが、その後ゆっくりと時間をかけて配向性が高くなると
　言われています。

EMCS

09 二価性試薬

EMCS

• 二価性試薬

架橋剤

• 製品コード
  E018　 EMCS
• CAS番號
  55750-63-5
• 化學(xué)名
  N-(6-Maleimidocaproyloxy)succinimide
• 分子式?分子量
  C₁₄H₁₆N₂O₆=308.29

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

Q

EMCSの使用方法を教えてください。

A

例：-Fab'のペルオキシダーゼ標(biāo)識-
【操作方法】
1）2 mg(50 nmoL)のペルオキシダーゼ（西洋ワサビ）を0.3 mL,0.1 Mリン酸ソーダ緩衝液(pH7.0)にとかす。
2）EMCSをDMFにとかし、17～83 μmol/mLとする。
3）EMCSの溶液0.03 mLをペルオキシダーゼ溶液0.3 mLに加えて、30℃に30分保つ。
4）反応液をセファデックス G-25カラム(1.0×45 cm)で0.1 Mリン酸ソーダ緩衝液(pH6.0)を使ってゲル濾過する。
5）得られたマレイミド?ペルオキシダーゼ(1.2-2.1マレイミド基/ペルオキシダーゼ分子）と
Fab'を30～50 nmol/mLの濃度で反応させると、高収率でモノマー標(biāo)識Fab'が得られる。
（他の酵素あるいは蛋白の場合は、EMCSの濃度を変えて、導(dǎo)入されるマレイミド基の數(shù)を調(diào)節(jié)することができる）

＊その他、プロトコル集「抗體を標(biāo)識したい(架橋剤)」もご覧下さい。

6-Amino-1-hexanethiol, hydrochloride

20 機(jī)能性有機(jī)材料

6-Amino-1-hexanethiol, hydrochloride

• 機(jī)能性有機(jī)材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬

• 製品コード
  A425　 6-Amino-1-hexanethiol, hydrochloride
• CAS番號
  31098-40-5
• 化學(xué)名
  6-Amino-1-hexanethiol, hydrochloride
• 分子式?分子量
  C₆H₁₆ClNS=169.72

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

Q

SAMsとはどのようなものですか？

A

固體表面に種々の分子が自発的に高密度?高配向な分子膜を
形成することを自己組織化(Self-assemble:SA)といい、
形成された単分子膜を自己組織化単分子膜(Self-Assembled Monolayers:SAMs)
といいます。

Q

SAMsを形成するための基板の浸漬條件を教えてください。

A

溶媒や濃度、および浸漬時間に制限はありませんが、
條件により膜の配向や密度に影響を與えます。
目的に応じて調(diào)整、検討を行ってください。
下記にこれまで報告されている浸漬條件の一例を示します。

(1)溶媒
　チオール類が溶解し、それらと化學(xué)反応しないものが使用可能です。
　エタノールを使用した報告例が比較的多くみられます。
　必要に応じて蒸留したものや、溶液中の溶存酸素を除去するために
　不活性ガス(窒素ガスまたはアルゴンガス）でバブリングしたものを
　使用します。
　また、末端NHSエステル型などは、アルコール類やアミン類および
　チオール類と反応する恐れがあり、溶媒中の水で分解する恐れも
　ありますので、脫水した溶媒を使用するなど、試薬によっては
　使用時に注意が必要な場合があります。

(2)溶液安定性
　溶媒中の溶存酸素によるチオールからジスルフィドへの酸化や
　水分による分解が考えられるため、溶液の用時調(diào)整をお勧めします。
　チオール溶液保存中に生成する副生成物は主にジスルフィドです。

(3)濃度
　數(shù)μ～數(shù)10 μmol/Lで一般的に行われています。

(4)浸漬時間
　數(shù)10分～數(shù)時間。
　濃度にもよりますが、チオール類の吸著は比較的短時間でもかなり飽和吸著に
　近い形で吸著しますが、その後ゆっくりと時間をかけて配向性が高くなると
　言われています。

GMBS

09 二価性試薬

GMBS

• 二価性試薬

架橋剤

• 製品コード
  G005　 GMBS
• CAS番號
  80307-12-6
• 化學(xué)名
  N-(4-Maleimidobutyryloxy)succinimide
• 分子式?分子量
  C₁₂H₁₂N₂O₆=280.23

• ご購入方法
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マニュアル

16-Amino-1-hexadecanethiol, hydrochloride

20 機(jī)能性有機(jī)材料

16-Amino-1-hexadecanethiol, hydrochloride

• 機(jī)能性有機(jī)材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬

• 製品コード
  A458　 16-Amino-1-hexadecanethiol, hydrochloride
• CAS番號
  1263190-70-0
• 化學(xué)名
  16-Amino-1-hexadecanethiol, hydrochloride
• 分子式?分子量
  C₁₆H₃₆ClNS=309.98

• ご購入方法
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マニュアル

Sulfo-EMCS

09 二価性試薬

Sulfo-EMCS

• 二価性試薬

架橋剤

• 製品コード
  S024　 Sulfo-EMCS
• CAS番號
  103848-61-9(free acid)
• 化學(xué)名
  N-(6-Maleimidocaproyloxy)sulfosuccinimide, sodium salt
• 分子式?分子量
  C₁₄H₁₅N₂NaO₉S=410.33

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

Amino-EG₆-undecanethiol, hydrochloride

20 機(jī)能性有機(jī)材料

Amino-EG₆-undecanethiol, hydrochloride

• 機(jī)能性有機(jī)材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬

• 製品コード
  A483　 Amino-EG₆-undecanethiol, hydrochloride
• CAS番號
  496839-01-1(free base)
• 化學(xué)名
  20-(11-Mercaptoundecanyloxy)-3,6,9,12,15,18-hexaoxaeicosane-1-amine, hydrochloride
• 分子式?分子量
  C₂₃SH₅₀ClNO₆S=504.16

• ご購入方法
• お問い合わせ

マニュアル

Sulfo-GMBS

09 二価性試薬

Sulfo-GMBS

• 二価性試薬

架橋剤

• 製品コード
  S025　 Sulfo-GMBS
• CAS番號
  185332-92-7
• 化學(xué)名
  N-(4-Maleimidobutyryloxy)sulfosuccinimide, sodium salt
• 分子式?分子量
  C₁₂H₁₁N₂NaO₉S=382.28

• ご購入方法
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マニュアル

Amine Coupling Kit

20 機(jī)能性有機(jī)材料

Amine Coupling Kit

• 機(jī)能性有機(jī)材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用キット

• 製品コード
  A515　 Amine Coupling Kit

• ご購入方法
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マニュアル

Sulfo-HMCS

09 二価性試薬

Sulfo-HMCS

• 二価性試薬

架橋剤

• 製品コード
  S026　 Sulfo-HMCS
• CAS番號
  211236-35-0
• 化學(xué)名
  N-(8-Maleimidocapryloxy)sulfosuccinimide, sodium salt
• 分子式?分子量
  C₁₆H₁₉N₂NaO₉S=438.39

• ご購入方法
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マニュアル

Biotin-SAM Formation Reagent

20 機(jī)能性有機(jī)材料

Biotin-SAM Formation Reagent

• 機(jī)能性有機(jī)材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬

• 製品コード
  B564　 Biotin-SAM Formation Reagent

• ご購入方法
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マニュアル