ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

08 ラベル化剤

ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

• ラベル化剤

エクソソーム 膜蛍光染色キット Deep Red

• 細(xì)胞外で凝集せず、より正確な動態(tài)を観察できる
• 本キットだけで蛍光標(biāo)識から精製まで可能

• 製品コード
  EX03　 ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red

※ 精製済エクソソーム（超遠(yuǎn)心法）として、タンパク質(zhì)：1-10 µg/sample、粒子數(shù)：10-100×10⁸個/sample

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• 

  細(xì)胞外小胞、エクソソームの特性と機(jī)能 小社季刊冊子「DojinNews vol.169」に執(zhí)筆いただいた記事を掲載しています。

Q

推奨されるエクソソームの精製法はありますか？

A

超遠(yuǎn)心法での精製を推奨しておりますが、免疫沈降法や磁気ビーズで精製したエクソソームの染色実績もございます。

なお、ポリマー沈殿法で精製したエクソソームは下記の理由により、殘存するポリマーの影響を受けるため、本キットでの染色はできません。

1)未反応色素の精製工程で使用するフィルトレーションチューブにポリマーがつまり、精製できなくなる可能性がございます。

2)ポリマーがエクソソームと相互作用し、エクソソームの膜電位が変わる可能性がございます。膜電位が変わると、細(xì)胞取り込みアッセイに標(biāo)識エクソソームを使用する場合、細(xì)胞內(nèi)動態(tài)が変化する恐れがございます。

Q

標(biāo)識後の精製操作でフィルターは著色していますが、未反応の色素は分離できていますか？

A

未反応の色素はフィルターに保持されるために著色が見られますが、小社では以下の実験でフィルター上の回収物に未反応色素が含まれないことを確認(rèn)しております。

＜実験條件＞
超遠(yuǎn)心法で精製した ①エクソソーム(タンパク質(zhì)量として10µg)のバッファー溶液 または ②バッファーのみ を各キットのプロトコルに従って染色操作したのち、得られた回収物をHeLa細(xì)胞(1.25×10⁴ cells)に添加して、4時間後の蛍光畫像を観察しました。

結(jié)果として、バッファーのみで得られた回収物は細(xì)胞へ添加しても蛍光輝點(diǎn)が観察されず、回収物に未反応の色素が殘っていないことを確認(rèn)しました。

①エクソソーム＋バッファーをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

②バッファーのみをキットで処理した場合

　　　　　　　　　　　　　　　　　　細(xì)胞へ添加後(4h)の蛍光畫像

■　検出條件

Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm
Red    ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm
Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

Q

染色後のエクソソームは保存できますか。

A

染色後のエクソソームの保存は推奨しておりません。
エクソソームの染色後はできるだけ早く実験にご使用ください。

Q

エクソソームの取込実験で使用実績のある培地を教えてください。

A

小社では染色後のエクソソームを用いた細(xì)胞への取り込み実験において、
MEM（Minimum Essential Medium）ならびにDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）での実績がございます。

なお、ExoSparklerシリーズは血清含有培地中での取込実験に最適化しているため、
無血清培地中で使用することはお勧めできません。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。