酒中氨基甲酸乙酯的測定

方法一、GC-MS 法 參照GB 5009.223-2014

摘要：本文參照食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)方法《GB 5009.223-2003 食品中氨基甲酸乙酯的測定》 ，進行了白酒中氨基甲酸乙酯含量的測定。采用商品化Cleanert EC氨基甲酸乙酯專用固相萃取柱（堿性硅藻土）進行樣品前處理，GC-MS法測定，結(jié)果表明氨基甲酸乙酯檢出限為2.0μg/kg，定量限為5.0 μg / kg（取樣2.00g），回收率在98.3%～104.5%；白酒樣品的日間精密度測試，RSD<3%。方法簡單，產(chǎn)品穩(wěn)定，結(jié)果準(zhǔn)確靈敏，完全滿足分析檢測的要求。

氨基甲酸乙酯(Ethyl Carbamate, EC)，是一種致癌物，可以引起肺腫瘤、淋巴癌、肝癌、皮膚癌等。它是發(fā)酵食物和酒精飲品在發(fā)酵或貯存過程中天然產(chǎn)生的污染物。2007年，世界衛(wèi)生組織的國際癌癥研究機構(gòu)( IARC) 正式將氨基甲酸乙酯( Ethyl Carbamate) 歸為2A類致癌物。因此對相關(guān)食品中進行氨基甲酸乙酯的檢測和監(jiān)測是非常必要的。

 

一、試劑和材料

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

1.0 mg/mL D5-氨基甲酸乙酯貯備液：準(zhǔn)確稱取10.0 mg D5-氨基甲酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇定容至10 mL。

2.0 μg/mL D5-氨基甲酸乙酯使用液：準(zhǔn)確吸取1.0 mg/mL D5-氨基甲酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.1 mL，用甲醇定容至50 mL。

1.0 mg/mL氨基甲酸乙酯貯備液：準(zhǔn)確稱取0.5000 g氨基甲酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇定容至50 mL。

分別準(zhǔn)確吸取一定量氨基甲酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)，加100 μL ?2.0 μg/mL的D5-氨基甲酸乙酯溶液，用甲醇定容至1.0 mL，得到10.0、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0、1000.0 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液（內(nèi)含200.0 ng/mL D5-氨基甲酸乙酯）

固相萃取柱：Cleanert JP氨基甲酸乙酯專用固相萃取柱（堿性硅藻土）

氣相色譜柱：DA-INNOWAX柱

?

二、實驗方法

樣品前處理

準(zhǔn)確量取 2.00 ml 酒樣（注：啤酒樣品EC含量較低，取4 mL樣品上樣），加 100 μL ?2.0 μg/ mL D5-氨基甲酸乙酯內(nèi)標(biāo)使用液、氯化鈉 0.3 g（白酒、醬油不加），超聲溶解、混勻，然后加樣到氨基甲酸乙酯上，抽真空，讓試樣慢慢滲入到Cleanert JP氨基甲酸乙酯專用固相萃取柱中，靜置約 10 min，先用10 mL 正己烷淋洗除雜，然后用 15 mL 5%乙酸乙酯/乙醚溶液以1 mL/min 流速洗脫并收集于10 mL 具塞刻度試管中，在室溫下用氮氣緩緩吹至0.5mL 左右，用甲醇定容至1.0 mL 制成測定液供GC/MS分析，同時做空白。

GC-MS條件

色譜柱：DA-INNOWAX柱，30 m*0.25 mm*0.25 μm；

進樣口溫度：220℃；柱溫：初溫 50℃，保持 1 min，然后以 8℃ / min 升至 180，然后以 15℃/ min 升至 210℃ 保持5 min；

載氣：氦氣，純度≥99.999％

流速：1 mL/min；

電離方式：EI源。

離子源溫度：230℃；

進樣方式：不分流進樣；

樣量：1-2μL；

氨基甲酸乙酯選擇監(jiān)測離子（m/z）： 62、76、89；定量離子62；

D5-氨基甲酸乙酯選擇監(jiān)測離子（m/z）64、76；定量離子64

 

三、實驗結(jié)果

色譜圖

 

圖1 氨基甲酸乙酯及內(nèi)標(biāo)總離子圖

 

圖2 氨基甲酸乙酯質(zhì)譜圖

 

 

3 內(nèi)標(biāo) D5-氨基甲酸乙酯質(zhì)譜圖

標(biāo)準(zhǔn)曲線

 

 

酒樣加標(biāo)的回收率及精密度

表1 白酒樣品加標(biāo)的回收率及精密度

 

序號	白酒樣品 （mg/L）	加標(biāo)量（mg/L）	測定濃度（mg/L）	回收量（mg/L）	回收率（%）	平均回收率 (%)	RSD %
1	73.86	100	178.32	104.46	104.5	101.4	2.51
2		100	176.78	102.92	102.9
3		100	175.64	101.78	101.8
4		100	173.25	99.39	99.4
5		100	172.20	98.34	98.3

表2 白酒樣品日間精密度

 

測定數(shù)據(jù)（mg/L）							平均值	RSD%
60.47	60.79	59.05	63.04	58.15	56.61	59.03	59.13	2.94
58.99	59.75	60.24	57.49	59.77	56.91	57.60

注：相同的樣品，，每天測定2次，連續(xù)7天內(nèi)測定數(shù)據(jù)

 

?

方法檢出限

當(dāng)試樣取2.00g時，本方法氨基甲酸乙酯檢出限為2.0μg/kg，定量限為5.0μg/kg。

?

四、結(jié)論

本文采用商品化Cleanert EC氨基甲酸乙酯專用固相柱（堿性硅藻土）前處理結(jié)合DA-INNOWAX柱進行白酒中氨基甲酸乙酯的測定，結(jié)果表明氨基甲酸乙酯檢出限為2.0 μg/kg，回收率在98.3% ～104.5%，完全滿足食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB5009.223-2014方法的檢測要求。

 

更多產(chǎn)品，更多優(yōu)惠，請聯(lián)系我們！
上海金畔生物科技有限公司
固話總機：021-50837765
訂貨熱線：15221999938
網(wǎng) 址： www.jinpanbio.com
金畔博客：www.japangirl.cn
Email：sales@jinpanbio.com