Quin 2

04 細(xì)胞內(nèi)蛍光プローブ

Quin 2

• 細(xì)胞內(nèi)蛍光プローブ

カルシウムイオン測(cè)定試薬

• 製品コード
  Q001　 Quin 2
• CAS番號(hào)
  73630-23-6
• 化學(xué)名
  8-Amino-2-[(2-amino-5-methylphenoxy)methyl]-6-methoxyquinoline-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetrapotassium salt
• 分子式?分子量
  C₂₆H₂₃K₄N₃O₁₀=693.87

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マニュアル

Q

細(xì)胞內(nèi)カルシウム測(cè)定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか？

A

測(cè)定機(jī)器や測(cè)定波長などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細(xì)胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
?2勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光：λem=500 nm
?解離定數(shù)：224 nmol/L
?蛍光強(qiáng)度比での測(cè)定が出來るので、誤差要因の補(bǔ)正を行なうことが出來る。
=>細(xì)胞內(nèi)Ca濃度の計(jì)算が行ない易い。
?最も多く使用されている。
?勵(lì)起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
?。C(jī)器の性能にもよる）

【Fluo 3】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=508 nm、蛍光：λem=527 nm
?解離定數(shù)：400 nmol/L
?勵(lì)起波長が長波長側(cè)にあるので細(xì)胞に與える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
?Arレーザーによる勵(lì)起裝置が使用出來る。
?スライス標(biāo)本には適さない
?。‵luo3がスライス表面の死んだ細(xì)胞に結(jié)合するのか、細(xì)胞外のカルシウム濃度を測(cè)定する）

【Fluo 4】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=495 nm、蛍光：λem=518 nm
?解離定數(shù)：360 nmol/L
?Fluo3よりも蛍光強(qiáng)度が強(qiáng)い。
?勵(lì)起波長が長波長側(cè)にあるので細(xì)胞に與える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
?Arレーザーによる勵(lì)起裝置が使用出來る。
?Fluo3よりも細(xì)胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
?1勵(lì)起2蛍光
　　勵(lì)起：λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
?解離定數(shù)：250 nmol/L
?勵(lì)起波長の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細(xì)胞の
　ような動(dòng)きの試料も測(cè)定できる（但し、検出器は2臺(tái)必要）

【Rhod 2】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=553 nm、蛍光：λem=576 nm
?解離定數(shù)：1.0 μmol/L
?勵(lì)起波長が長波長側(cè)にあるので細(xì)胞に與える障害が少ない
?。∟ADH,NADPHの影響が出ない）
?Arレーザーによる勵(lì)起裝置が使用出來る。

【Quin 2】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=339 nm、蛍光：λem=492 nm
?解離定數(shù)：110 nmol/L
?一番最初に開発されたプローブ

Q

はじめて測(cè)定します。Ca²⁺プローブの原理や測(cè)定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺測(cè)定をされる方を?qū)澫螭趣筏骏抓恁去偿毪蜃鞒嗓筏皮辘蓼埂?br /> 原理、Ca²⁺プローブの特徴、測(cè)定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご參照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺を測(cè)定する方へ　－カスタマーサポート擔(dān)當(dāng)者の視點(diǎn)から－」