日本同仁化學(xué)カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　

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カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　Rhod 2-AM

04 細(xì)胞內(nèi)蛍光プローブ

Rhod 2-AM

カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　

  • 細(xì)胞內(nèi)蛍光プローブ

カルシウムイオン測(cè)定試薬

  • 製品コード
    R002　 Rhod 2-AM
  • CAS番號(hào)
    145037-81-6
  • 化學(xué)名
    1-[2-Amino-5-(3-dimethylamino-6-dimethylammonio-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetraacetoxymethyl ester, bromide
  • 分子式?分子量
    C52H59BrN4O19=1123.94
容　量 メーカー希望
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和光純薬
1 mg ￥56,600 341-05821
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マニュアル

  • プロトコル カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　 蛍光で細(xì)胞內(nèi) Ca を測(cè)定したい
    カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　

技術(shù)情報(bào)

溶解例

1 mg/mL(DMSO), 50 mg/mL(クロロホルム)

參考文獻(xiàn)

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參考文獻(xiàn)

1) M. Burnier, G. Centeno, E. Burki and H. R. Brunner, "Confocal Microscopy to Analyze Cytosolic and Nuclear Calcium in Cultured Vascular Cells", Am. J. Physiol., 1994, 266, C1118. 
2) J. Vergara, M. Difranco, D. Compagnon and B. A. Suarez-Isla, "Imaging of Calcium Transients in Skeletal Muscle Fibers", Biophys. J., 1991, 59, 12. 
3) T. Meyer, T. Wensel and L. Stryer, "Kinetics of Calcium Channel Opening by Inositol 1,4,5-Trisphosphate", Biochemistry, 1990, 29, 32. 
4) A. Minta, J. P. Y. Kao and R. Y. Tsien, "Fluorescent Indicators for Cytosolic Calcium Based on Rhodamine and Fluorescein Chromophores", J. Biol. Chem., 1989, 264(14), 8171. 
5) D. R. Trollinger, W. E. Cascio and J. J. Lemasters, "Selective Loading of Rhod 2 into Mitochondria Shows Mitochondrial Ca2+ Transients during the Contractile Cycle in Adult Rabbit Cardiac Myocytes", Biochem. Biophys. Res. Commun.,> 1997, 236, 738.

よくある質(zhì)問

Q

細(xì)胞內(nèi)カルシウム測(cè)定試薬は何種類かありますが、どのように選べばよいのでしょうか？

A

測(cè)定機(jī)器や測(cè)定波長(zhǎng)などで選ばれることが多いようです。
製品名の後ろに[-AM]が付いているものは細(xì)胞膜透過型になります。
それぞれの試薬の特性は

【Fura 2】
?2勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起(λex= Ca:340 nm, Ca free:380 nm)、蛍光：λem=500 nm
?解離定數(shù)：224 nmol/L
?蛍光強(qiáng)度比での測(cè)定が出來るので、誤差要因の補(bǔ)正を行なうことが出來る。
=>細(xì)胞內(nèi)Ca濃度の計(jì)算が行ない易い。
?最も多く使用されている。
?勵(lì)起フィルターを切替えなくてはいけないので、切替え間のタイムロスがある。
?。C(jī)器の性能にもよる）

【Fluo 3】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=508 nm、蛍光：λem=527 nm
?解離定數(shù)：400 nmol/L
?勵(lì)起波長(zhǎng)が長(zhǎng)波長(zhǎng)側(cè)にあるので細(xì)胞に與える障害が少ない
　（NADH,NADPHの影響が出ない）
?Arレーザーによる勵(lì)起裝置が使用出來る。
?スライス標(biāo)本には適さない
?。‵luo 3がスライス表面の死んだ細(xì)胞に結(jié)合するのか、細(xì)胞外のカルシウム濃度を測(cè)定する）

【Fluo 4】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=495 nm、蛍光：λem=518 nm
?解離定數(shù)：360 nmol/L
?Fluo3よりも蛍光強(qiáng)度が強(qiáng)い。
?勵(lì)起波長(zhǎng)が長(zhǎng)波長(zhǎng)側(cè)にあるので細(xì)胞に與える障害が少ない
?。∟ADH,NADPHの影響が出ない）
?Arレーザーによる勵(lì)起裝置が使用出來る。
?Fluo 3よりも細(xì)胞毒性がでやすい。

【Indo 1】
?1勵(lì)起2蛍光
　　勵(lì)起：λex= 330 nm、蛍光(λem= Ca:410 nm, Ca free:485 nm)
?解離定數(shù)：250 nmol/L
?勵(lì)起波長(zhǎng)の切替えの必要がないので、非常に早い速度のCa濃度変化や心筋細(xì)胞の
　ような動(dòng)きの試料も測(cè)定できる（但し、検出器は2臺(tái)必要）

【Rhod 2】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=553 nm、蛍光：λem=576 nm
?解離定數(shù)：1.0 μmol/L
?勵(lì)起波長(zhǎng)が長(zhǎng)波長(zhǎng)側(cè)にあるので細(xì)胞に與える障害が少ない
?。∟ADH,NADPHの影響が出ない）
?Arレーザーによる勵(lì)起裝置が使用出來る。

【Quin 2】
?1勵(lì)起1蛍光
　　勵(lì)起：λex=339 nm、蛍光：λem=492 nm
?解離定數(shù)：110 nmol/L
?一番最初に開発されたプローブ

Q

はじめて測(cè)定します。Ca2+プローブの原理や測(cè)定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細(xì)胞內(nèi)Ca2+測(cè)定をされる方を?qū)澫螭趣筏骏抓恁去偿毪蜃鞒嗓筏皮い蓼埂?br /> 原理、Ca2+プローブの特徴、測(cè)定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご參照下さい。

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カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　 カルシウムイオン測(cè)定試薬 Rhod 2-AM　

取扱條件

規(guī)格
性狀： 本品は、暗紫色固體でクロロホルムに溶ける。
蛍光スペクトル： 試験適合
NMRスペクトル： 試験適合
取扱條件
1.保存方法：冷凍,遮光
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