Glucose Uptake Assay Kit-Green

01 細(xì)胞増殖/細(xì)胞毒性測(cè)定用試薬

Glucose Uptake Assay Kit-Green

• 細(xì)胞増殖/細(xì)胞毒性測(cè)定用試薬
• 細(xì)胞機(jī)能解析
• 細(xì)胞老化
• 細(xì)胞內(nèi)代謝
• 蛍光色素
• 顕微鏡
• FCM

グルコース取り込み検出キットGreen

• グルコース取り込み能力を高感度かつ簡(jiǎn)便に測(cè)定できる
• プレートリーダーを用いて測(cè)定が可能
• 取り込まれた色素の漏れ出しを抑制し、再現(xiàn)性の高いデータを取得できる

• 製品コード
  UP02　 Glucose Uptake Assay Kit-Green

使用回?cái)?shù)の目安
1 set あたり、35 mm dish 12 枚、96-well plate 1 枚

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マニュアル

Q

Glucose Uptake Probe-Greenはどのグルコーストランスポーターを介して取り込まれるのでしょうか？

A

複數(shù)のトランスポーターを介して細(xì)胞內(nèi)へ取り込まれていると推測(cè)されますが、各グルコーストランスポーターに対する特異性や親和性に関する詳細(xì)なデータはございません。

Q

使用実績(jī)のある細(xì)胞種を教えてください。

A

下記の細(xì)胞においてプローブの使用実績(jī)があります。

細(xì)胞		Probe stock solutinの希釈倍率	染色時(shí)間
ヒト肺胞基底上皮腺癌細(xì)胞	A549	x 500	15分
ヒト肝癌由來細(xì)胞	HepG2	x 500	15分
前駆脂肪細(xì)胞	preadipocyte(3T3-L1)	x 500	15分
脂肪細(xì)胞	adipocyte(3T3-L1)	x 500	15分
悪性黒色腫	MO5	x 500	15分
マウス筋芽細(xì)胞	C2C12	x 500	5分
アストロサイト―マ	U-251 MG	x 500	15分
ヒト子宮頸癌由來細(xì)胞	HeLa	x 500	15分
ルイス肺がん由來細(xì)胞	3LL	x 50000	15分
T細(xì)胞	CD4+ T cell	x 50, x500	15分
マウスマクロファージ様株化細(xì)胞	J774.1	x 500	15分
線蟲	N2	x 500	90分

Q

Glucose Uptake Probe-Greenは細(xì)胞內(nèi)に取り込まれた後、分解?代謝されるのでしょうか？

A

蛍光色素部位は安定な構(gòu)造を有しているため、実験操作內(nèi)において分解されることはございません。グルコース部位は、構(gòu)造上ヘキソキナーゼによるリン酸化を受けることが考えられますが、それ以降の代謝は行われないと考えられます。

Q

Glucose Uptake Probe-Greenを生細(xì)胞へ取り込ませた後、固定することは可能でしょうか？

A

プローブが細(xì)胞內(nèi)から漏出するため、染色後の細(xì)胞を固定することはできません。

Q

プレートリーダーで測(cè)定する場(chǎng)合、どのプレートを使用すればよいでしょうか？

A

蛍光検出のため細(xì)胞培養(yǎng)用のブラックマイクロプレートをご使用ください。

Q

Probe working solutionは保存可能でしょうか？

A

Probe working solutionは保存できません。Probe stock solutionは冷凍保存が一か月間可能です。

Q

蛍光シグナルの変化が観察されない場(chǎng)合、どうすればいいですか？

A

初期検討としてプローブ濃度(x250～x1,000)や染色時(shí)間(15分～1時(shí)間程度)をご検討下さい。

Q

バックグラウンドが高い場(chǎng)合、どうすればいいですか？

A

細(xì)胞に取り込まれなかったプローブが殘存している可能性があります。WI solutionによる洗浄操作をもう一度行ってください。

Q

Glucose Uptake Probe-Greenに細(xì)胞毒性はありますか？

A

弊社製品のCell Counting Kit-8 (CK04)を用いてA549細(xì)胞におけるプローブの細(xì)胞毒性を調(diào)査した結(jié)果、細(xì)胞毒性は確認(rèn)されませんでした。

Q

WI solutionを用いて洗浄した後、プローブはどのくらいの時(shí)間細(xì)胞內(nèi)に保持されますか？

A

室溫で約１時(shí)間程度は細(xì)胞內(nèi)に保持されます。ただし、細(xì)胞の種類によって異なることが考えられます。

Q

グルコースの定量はできますか？

A

本製品を用いてグルコースを定量することはできません。

培地中のグルコース消費(fèi)量や細(xì)胞內(nèi)のグルコース量を定量したい場(chǎng)合は、弊社 グルコース代謝測(cè)定キット Glucose Assay Kit-WST (G264) をご使用下さい。

Q

取り込まれた色素の定量はできますか？

A

取り込まれた色素の定量を行う事はできません。本色素は、グルコース取り込み能力の増減を確認(rèn)するための色素となります。

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。