血清·血漿（Serum·Plasma）microRNA提取試劑盒

microRNA Extractor(R) SP Kit

 

　　本產(chǎn)品主要用于提取人（或者實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠等）血清、血漿中microRNA。不使用苯酚和氯仿等有害物質(zhì)，蛋白酶和離液劑、離心柱組合使用可簡(jiǎn)便且高效率獲得血清·血漿中microRNA。適用于提取血液循環(huán)microRNA，各種疾病研究、檢測(cè)活體轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中血液siRNA殘留量樣本的制備。

◆試劑盒組成（50次/試劑盒）

　　(1)　Lysis Solution 19ml×1 bottle
　　(2)　Reducing Agent 50μL×1 vial
　　(3)　Protease Solution 500μL×1 vial
　　(4)　Enhancer 500μL×1 vial
　　(5)　Wash SolutionⅠ 12mL×1 bottle
　　(6)　Wash SolutionⅡ 21mL×1 bottle
　　(7)　Elution Solution 5mL×1 bottle
　　(8)　Spin Column 50 columns
　　(9)　Collection Tube 50 tubes

需要以下試劑

　　1-Butanol（Code No.022-16035）
　　2-Propanol（Code No.168-21675）
　　Ethanol（Code No.054-07225）

<用前注意事項(xiàng)>

　　血漿的抗凝劑請(qǐng)使用EDTA或者檸檬酸。如果使用肝素的話(huà)，會(huì)影響RNA提取后的PCR檢測(cè)。

 

◆實(shí)驗(yàn)流程

　　詳細(xì)實(shí)驗(yàn)流程請(qǐng)看相關(guān)資料的說(shuō)明書(shū)

正常人血漿microRNA提取·定量結(jié)果

內(nèi)源性has-miR-16定量結(jié)果　　　　　　　　　　　內(nèi)源性has-miR-451定量結(jié)果

本產(chǎn)品比以往方法有更高的提取效率（試劑盒·試劑的比較對(duì)象）

A公司試劑盒：有機(jī)溶劑與硅膠膜柱組合產(chǎn)品

B公司試劑盒：有機(jī)溶劑與硅膠膜柱組合產(chǎn)品

C公司試劑：AGPC法產(chǎn)品。

 

正常人血漿·血清microRNA提取·定量結(jié)果

內(nèi)源性has-miR-16 定量結(jié)果

本產(chǎn)品的血漿、血清提取率比其他產(chǎn)品高

左圖：正常人血漿（抗凝劑：EDTA）右圖：正常人血清

定量檢測(cè)：TaqMan^? MicroRNA Assays（Life Technologies公司）

上圖顯示在血漿·血清提取效率方面，本試劑盒比A公司產(chǎn)品更高。另外，血漿比血清含有更多microRNA。

 

大鼠血漿·血清microRNA提取·定量結(jié)果

內(nèi)源性rno-miR-16 提取▪定量結(jié)果

●　提取對(duì)象：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物亦可 ●　血漿的抗凝劑：EDTA。 ●　定量檢測(cè)：TaqMan? MicroRNA Assays（Life Technologies公司）。 ●　已確認(rèn)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠）的血漿以及血清的提取效率方面，使用本試劑盒比A公司試劑盒高。

回收效率的可重復(fù)性評(píng)估

正常人血漿滴加cel-miR-238定量回收結(jié)果

●　確認(rèn)可重復(fù)性高 ●　定量檢測(cè)：TaqMan?MicroRNA Assays（Life Technologies公司）。 ●　左圖是添加10^4~10^8拷貝數(shù)的cel-miR-238至正常人血漿（抗凝劑：檸檬酸鈉）的回收率。 ●　在添加10^4拷貝數(shù)／test的低濃度下能夠穩(wěn)定地回收microRNA，回收率在60%-80%。與基因組DNA和total RNA相比獲取較困難的低分子RNA也具有高回收率。 ●　注意：將Protocol記錄的洗脫液添加量從50μL提升到100μL，回收率增加5~20%。

相關(guān)資料

說(shuō)明書(shū)