從土壤提取RNA試劑盒

ISOIL for RNA

       

　　ISOIL for RNA適用于從土壤樣品提取RNA?？衫么胖閷毎谳^厚的微生物進行強力的破壞，并利用試劑進行溶菌裂解，從而提取其RNA。RNA提取液添加氟化物，可從非火山灰土壤及火山灰土壤提取RNA。進行純化時，采取有效去除阻礙酶反應(yīng)的腐殖質(zhì)等雜質(zhì)，可簡單地純化出高純度RNA。提取到的土壤RNA可用于RT PCR-DGGE分析及RT real-time PCR。

　　本產(chǎn)品是從日本土壤提取RNA的最適合產(chǎn)品，僅需約4小時即可提取大量的高純度RNA。

　　使用時，需配合磁珠式破碎裝置（適用2ml試管）使用。

◆特點

　　?　適用于火山灰土壌(火山灰土等)

　　?　有效提取高純度RNA

　　?　操作用時僅需約4小時

◆產(chǎn)品內(nèi)容

ISOIL for RNA （50次用量）

產(chǎn)品	包裝	保存	備注
Beads Tube R  （ISOIL  for RNA）	50 瓶	室溫	2 ml 容量的試管中含有磁珠。
Sodium Silicofluoride Solution	10 ml x 1	室溫	非醫(yī)療用劇毒物 氟硅酸鈉溶液
Lysis Solution R	1.25 ml x 3	室溫
Lysis Solution 20S	25 ml x 1	室溫	Lysis Solution   20S有可能析出白色結(jié)晶，不影響其品質(zhì)及性能。如發(fā)生此情況，請65°C條件下，對整個容器進行孵化（適當(dāng)混合），待結(jié)晶完全溶解后使用。
Purification Solution R	25 ml x 1	室溫	Purification   Solution R有可能析出白色結(jié)晶不影響其品質(zhì)及性能。如發(fā)生此情況，請65°C條件下，對整個容器進行孵化（適當(dāng)混合），待結(jié)晶完全溶解后使用。
Precipitation Solution R	35 ml x 1	室溫（冷藏）	開封后需冷藏（2～10°C）。Precipitation Solution R較容易發(fā)霉，如發(fā)現(xiàn)溶液中有浮游物，請停止使用，并購買新的試劑盒。
Ethachinmate	100 μl x 1	室溫（冷藏）	開封后需冷藏（2～10°C）。
3M Sodium Acetate（pH5.2）	500 μl x 1	室溫
TE（pH8.0）	10 ml x 1	室溫
Deoxyribonuclease（RT Grade）	250 units x 1	-20°C
10X DNase（RT Grade）Buffer	1 ml x 1	-20°C
2 mg/ml BSA Solution	1 ml x 1	-20°C

◆使用例子

操作流程

      

　　▶　^*1）～^*17）　注釋請參照產(chǎn)品手冊。

操作實例 　從英石火山灰土壤提取RNA（電泳結(jié)果及RT-PCR）

　　從8種土壤樣品提取RNA。 分別使用ISOIL for RNA從0.5g、0.25g的含有英石的火山灰土壤中提取RNA ，配制成溶液（10μl）后，4.7μl用于電泳取樣后，0.5g的土壤樣品為冷藏（4℃）一周，0.25g的土壤樣品為冷藏（4℃）三周。

        

                                 從0.5 g的樣品提取RNA溶液

　　▶　一般情況下，可以從土壤中提取RNA，但有些土壤種類難以提取。

　　　　

　　　　　　從0.25 g的樣品提取RNA溶液

　　▶　對于難以從0.5g樣品提取RNA的土壤，減少樣品品量，即可回收更多的RNA。

　　將實驗中的0.5g土壤樣品RNA溶液作為模板，使用RT-PCR擴增16S rRNA（約 200 base）將獲得的PCR產(chǎn)物進行電泳。

　　　　

　　　　　　　　　　　　　　RNA 溶液的RT-PCR

　　Lane 1　東大彌生農(nóng)場對照區(qū)土壌 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）

　　Lane 2　東大牧場 牧草地 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 3　筑波 農(nóng)業(yè)環(huán)境技術(shù)研究所 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 4　東大田無牧草地 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 5　草地試驗場常年採草地土壌 （灰色低地土、含有一部分火山灰土壌）
　　Lane 6　千葉農(nóng)試森林土壌 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 7　兵庫農(nóng)試森林土壌 （褐色森林土、非火山灰土壌）
　　Lane 8　富山縣 射水市 片口田土壌 （非火山灰土壌）
　　M　RNA Ladder
　　M11　Marker 11（pUC19/Msp I digest）

　　▶　即使是難以從0.5g樣品提取RNA的土壤，也可從RNA 溶液獲得RT-PCR產(chǎn)物。

◆備注

　　?　本產(chǎn)品是實驗研究試劑。請勿用于醫(yī)療及其他用途。

　　?　如果您對試劑的基本的知識不了解，請不要使用。

　　?　Sodium Silicofluoride Solution（氟硅酸鈉溶液）為非醫(yī)療用劇毒物（苯酚制劑），請小心操作

　　?　使用時請穿著適當(dāng)?shù)姆雷o設(shè)備（手套、眼鏡等）。

　　?　請按照說明書進行操作。

　　?　對于因不按照說明書操作而導(dǎo)致的事故，Nippon Gene不負任何責(zé)任。

License

　　Nippon Gene 公司正向獨立行政法人科學(xué)技術(shù)振興機構(gòu)（JST）申請ISOIL for RNA土壌RNA提取法的專利。土壌RNA的提取法及純化法已獲得JST的認可。

◆資料 Data Sheet

　　產(chǎn)品手冊

　　·         ISOIL for RNA 第一版 （PDF 192 KB）

　　SDS(Safety Data Sheet)

　　·         ISOIL for RNA （PDF）

◆相關(guān)產(chǎn)品

　　·         土壌提取DNA試劑盒　ISOIL

　　·         土壌提取DNA試劑盒　ISOIL for Beads Beating

　　·         土壌（5g）提取DNA試劑盒　ISOIL Large for Beads ver.2

Q:　　按照操作流程進行了DNase 處理，RNA 溶液里有DNA殘留。

A:　　某些土壤樣品難以去除雜質(zhì)（尤其是英石火山灰土壤），阻礙DNase處理等酶反應(yīng)。建議使用RNA 提取?純化試劑盒 ISOGEN II。