ISOGEN、ISOGEN-LS                                                    

RNA提取試劑

　　　　　　

                                                    　ISOGEN

            ?。◤淖蟮接?/span>200 ml,100 ml, 50 ml）

ISOGEN

　　ISOGEN是從人、動物、植物及細(xì)菌提取RNA試劑?？赏ㄟ^液相分離方法從同一樣本中分離DNA及蛋白質(zhì)?？赏ㄟ^一系列的操作分離RNA、DNA、蛋白質(zhì)，有助于分析珍貴的樣本。操作簡單，便于樣本數(shù)量較多的檢測。

　　適用樣本：組織、細(xì)胞、植物、細(xì)菌

ISOGEN-LS

　　ISOGEN-LS是從血液或血清等容量較大（＞100 μl：使用1.5 ml塑料（離心）管進(jìn)行處理），難以濃縮的液體樣本中提取RNA的試劑。是將ISOGEN針對液體試劑進(jìn)行改良。除了加入到樣本的ISOGEN-LS量比不一樣以外，得到的結(jié)果與使用 ISOGEN時(shí)一樣。

　　適用樣本： 全血、液體樣本

◆原理

　　本產(chǎn)品是含有苯酚及硫氰酸胍的均一液體。往樣本加入ISOGEN或ISOGEN-LS后使其溶解或均勻化，再加入氯仿進(jìn)行離心分離，勻漿就會分離成水相、中間相及有機(jī)相。水相中只有RNA，DNA及蛋白質(zhì)存在于中間相及其以下。首先，取出水相，加入異丙醇使RNA沉淀。往剩余的中間相及有機(jī)相里加入乙醇使DNA沉淀，加入異丙醇使蛋白質(zhì)沉淀，從而依次分離出RNA、DNA及蛋白質(zhì)。

　　　　　　

◆特點(diǎn)

　　?主要成分為苯酚及硫氰酸胍的均一溶液

　　?便于液層分離的染色溶液（ISOGEN : 藍(lán)色、ISOGEN-LS : 紅色）

　　?可通過一系列的操作分離RNA、DNA、蛋白質(zhì)

　　?操作簡單、迅速 （RNA分離用時(shí): 約1個(gè)小時(shí)、DNA : +2小時(shí)、蛋白質(zhì): +2.5小時(shí)）

　　?高回收率、組織及培養(yǎng)細(xì)胞樣本請使用ISOGEN

　　?血液等容量大，難以濃縮的液體樣本請使用ISOGEN-LS

◆產(chǎn)品列表

ISOGEN?。?0 ml、50 ml、100 ml、200 ml）
產(chǎn)品	容量	保存	備注
ISOGEN	1瓶	2～10°C   (遮光)	非醫(yī)療用，劇毒物   外觀：藍(lán)色溶液   容器（塑膠瓶）存放于保管袋。

 

ISOGEN-LS　（10 ml、100 ml）
產(chǎn)品	容量	保存	備注
ISOGEN-LS	1瓶	2～10°C   (遮光)	非醫(yī)療用，劇毒物   外觀：紅色溶液   容器（塑膠瓶）存放于保管袋。

運(yùn)輸方法

　　本品在室溫下運(yùn)輸。產(chǎn)品到達(dá)后，在2~10℃條件下保存即可正常使用。

◆使用案例

操作步驟

RNA分離	DNA分離	蛋白質(zhì)分離
操作流程1-1 RNA分離	操作流程2 DNA分離	操作流程3 蛋白質(zhì)分離
操作流程1-2 微量樣本RNA分離
操作流程1-3 植物樣本RNA分離

　　

ISOGEN及ISOGEN-LS的操作流程請參考產(chǎn)品說明。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)一覽

　　·　取量的標(biāo)準(zhǔn)

　　·?。糏SOGEN＞ISOGEN法與硫氰酸胍-氯化銫（GT-CsCl）超速離心法比較

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法分離總RNA電泳

　　·?。糏SOGEN＞ISOGEN法分離RNA、DNA及蛋白質(zhì)Northern、Southern、Western印跡法

　　·?。糏SOGEN-LS＞ISOGEN法分離hepatitis C viral （HCV） RNA的RT-PCR

◆注意事項(xiàng)

　　·　如果您對試劑的基本的知識不了解，請不要使用。

　　·　ISOGEN及ISOGEN-LS是非醫(yī)療用醫(yī)劇毒物（苯酚制劑），請小心操作。

　　·　使用時(shí)請穿著適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)設(shè)備（手套、眼鏡等）。

　　·　如果接觸皮膚或眼睛，請用大量的水沖洗15分鐘或以上，并及時(shí)就診。

　　·　請按照說明書進(jìn)行操作。

　　·　對于因不按照說明書操作而導(dǎo)致的事故，Nippon Gene不負(fù)任何責(zé)任。

◆備注

　　本產(chǎn)品是實(shí)驗(yàn)研究用試劑，請勿用作醫(yī)療用途。

◆資料 Data Sheet

產(chǎn)品手冊

　　·　ISOGEN,ISOGEN-LS　產(chǎn)品說明書（H18年7月修訂版） （PDF 92KB）

SDS（Safety Data Sheet）

　　·　ISOGEN 　安全標(biāo)簽（PDF）

　　·　ISOGEN-LS 　安全標(biāo)簽（PDF）

◆相關(guān)產(chǎn)品

　　·　ISOGEN II total RNA及small RNA抽提試劑　

　　·　ISOGEN with Spin Column RNA抽提試劑

　　·　Ethachinmate 用于從微量樣本抽提RNA的酒精沉淀共沉淀劑

　　·　緩沖劑

　　·　Deoxyribonuclease（RT Grade）for Heat Stop

　　·　Deoxyribonuclease（RT Grade）

　　·　DNase I (RNase free)

Q:　　從革蘭氏陽性菌提取RNA的方法

A:　　總體來說，革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁較厚，普通的操作流程回收到的RNA的量比革蘭氏陰性菌少。因此，使用玻璃珠（0.1 – 0.15 mm）破壞革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁后，用ISOGEN提取RNA。

　　使用ISOGEN從革蘭氏陽性菌抽提RNA – CN.pdf

Q:　　從酵母提取RNA的方法

A:　　酵母的細(xì)胞壁較厚，僅僅進(jìn)行普通的ISOGEN/ISOGEN-LS處理，難以回收RNA。因此，使用作用于β -1,3結(jié)合的葡萄糖聚合物的Zymolyase對細(xì)胞壁進(jìn)行溶解，提取RNA。

　　使用ISOGEN／ISOGEN-LS從酵母抽提RNA -CN.pdf

Q:　　從骨頭提取RNA的方法

A:　　使用ISOGEN從大鼠脊椎提取總 RNA，并檢測其回收量及純度。　　

　　使用ISOGEN從骨頭抽提RNA  – CN.pdf

Q:　　可以分開提取小RNA和高分子RNA嗎？

A:　　本產(chǎn)品無法分開回收小RNA和高分子RNA，但是本產(chǎn)品的升級產(chǎn)品ISOGEN II可以分開回收高分子RNA（＞200 bases）和小RNA（＜200 bases）。

　　　分離操作流程（前往ISOGEN II 產(chǎn)品頁面鏈接）

　　[ 1 ]　Chomczynski, P. and Sacchi, N.: Anal.Biochem., 162, 156 （1987）

　　[ 2 ]　Chomczynski, P.: BioTechniques, 15, 532 （1993）

　　[ 3 ]　Chomczynski, P., Bowser-Finn, R. and Sabatini, N.: The Jounal of NIH Research, 6,83 （1994）

　　[ 4 ]　Chomczynski, P. and Mackey, K., BioTechniques, 19, 942-945 （1995）

License

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