顯色法檢測組胺試劑盒

　　

　　組胺多數(shù)產(chǎn)生于金槍魚，鰹魚，鯖魚此類海鮮的腐敗過程中。

　　對于以生魚（鮮魚、冷凍魚肉）為原料的食品來說，為了防止組胺過量而導(dǎo)致過敏性中毒，對于食品組胺濃度測定的管理是很重要的。

　　但是，以前的組胺檢測需要耗時一天，檢測費用高，需要使用大型檢測設(shè)備。如果用顯色法組胺檢測系統(tǒng)，生魚（鮮魚、冷凍魚肉）的組胺含量檢測可以快捷地完成。

獲獎情況：

　　2007年日本水產(chǎn)學(xué)會的水產(chǎn)技術(shù)獎

　　2014年日本醬油協(xié)會的日本醬油技術(shù)獎（應(yīng)用部門）

 

◆特點

　　●　簡單： 前處理操作簡單，可以省略熒光光譜法和高效液相色譜法那樣測定障礙物質(zhì)復(fù)雜的前處理操作。由于酶的特異性高，無需使用強酸或有機溶劑，任何對象均可簡單、安全地分析

　　●　迅速： 利用具有高組胺特異性的組胺脫氫酶的酶法來檢測。如果是生魚，檢測和提取過程僅需要1個小時即可得到結(jié)果。

　　●　廉價： 用廉價的試劑和檢測器就可檢測，免除了儀器成本。

 

◆測定原理

　　組胺含有1－Methoxy PMS的情況下，添加組胺脫氫酶會被特異性分解。此時因產(chǎn)生的電子轉(zhuǎn)移會通過四唑鹽顯色，便可以在470nm上下測量吸光度，計算組胺濃度。

◆性能

　　●　特異性：即使樣本中含有尸胺和腐胺等其他的胺類也不影響檢測結(jié)果。

　　●　測定范圍：0.4-6ppm生魚樣本換算10-150ppm（稀釋25倍）。

　　●　測定時間：各試劑注入后約20分鐘。

◆試劑盒內(nèi)容

試劑名	主要成分	包裝
酶	組胺脫氫酶	冷凍干燥品  6瓶
顯色試劑	WST-8/1-Methoxy PMS	冷凍干燥品  6瓶
緩沖液	Tris緩沖液	24mL  3瓶
標(biāo)準(zhǔn)液（30mL）	組胺	30mL  1瓶

（60次測定：10次×6）（2-8℃保存）

注意：

　　●　測定儀器請使用分光光度計（可檢測到470nm左右） 。 *如需儀器推薦：分光光度計B

　　●　此試劑除了自主衛(wèi)生檢查和研究用途以外不用。

 

◆宣傳彩頁

顯色法檢測組胺試劑盒

◆操作視頻

請點擊鏈接觀看視頻：http:///resources/show/43.html

其他組織樣品的組胺檢測試劑盒（欲了解詳情請點擊文字）

Q&A導(dǎo)讀：

◆關(guān)于組胺

◆關(guān)于龜甲萬的組胺檢測法

◆關(guān)于顯色法組胺檢測試劑盒

◆關(guān)于從樣本中提取組胺

◆關(guān)于檢測值有誤的問題

◆關(guān)于組胺

Q1：　什么是組胺？

A1：　一種由組氨酸（氨基酸）合成的胺。如果紅身魚（金槍魚，秋刀魚，鰹魚，竹莢魚，青花魚等）等含有大量

　　　 組氨酸的食物，被組胺菌污染的話，會產(chǎn)生組胺。

　　　 另外，一般來說，人的喉嚨和鼻粘膜上皮都存在著很多肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等。一旦數(shù)量過多，也會引

　　　 起過敏癥狀。

 

Q2：　什么是過敏性食物中毒（組胺中毒）？

A2：　紅身魚被組胺菌污染的原因是，食品在制造加工、運輸時，在家庭等地方的保存溫度管理不當(dāng)時，組胺菌繁

　　　 殖增多，產(chǎn)生大量組胺。（參照：Q1.什么是組胺？）

　　　 組胺非常耐熱，一旦生成，普通的加熱處理無法使它分解，還是會殘留在魚肉里。因此，人們食用了被組胺

　　　 污染的魚或其加工食品，可能會出現(xiàn)過敏癥狀。在食品安全學(xué)上，這種癥狀被稱為過敏性食物中毒（組胺中

　　　 毒）。

Q3：　食物中含有多少組胺時，會引起食物中毒？

A3：　一般來說，食物的組胺含量超過100mg/100g＝1000ppm以上的話，會引起食物中毒。

　　　 組胺是會引起過敏反應(yīng)，胃酸分泌，血壓等各種生理反應(yīng)的化學(xué)物質(zhì)。因此，攝取高濃度組胺的話，約30分

　　　 鐘~60分鐘后，會出現(xiàn)面部、特別是嘴巴周圍以及耳垂的泛紅癥狀，還會出現(xiàn)頭痛，蕁麻疹，發(fā)熱等。一般

　　　 經(jīng)過6~10小時后會恢復(fù)正常。

Q4：　對于食物中含有的組胺量標(biāo)準(zhǔn)，是否有相關(guān)規(guī)定？

A4：　日本：沒有相關(guān)法制規(guī)定。

　　　 歐美：有相關(guān)規(guī)定。因此，出口到歐美國家的食品，必須要嚴(yán)格遵守規(guī)定。

Q5：　有什么方法可以檢測組胺量？

A5：　檢測魚肉中的組胺量方法：生物檢測技術(shù)，比色法，熒光法，高速色譜法（HPLC），抗原 – 抗體反應(yīng)和毛

　　　 細(xì)管電泳等。

　　　 一般來說，日本是使用衛(wèi)生檢測法的HPLC法；美國則是使用熒光光度法（被記載于國際標(biāo)準(zhǔn)—-AOAC法

　　　 內(nèi)）。

◆關(guān)于龜甲萬的組胺檢測法

Q1：　龜甲萬的組胺檢測法與其他檢測法相比有什么優(yōu)點？

A1：　?提取組胺的方法簡單，無需進(jìn)行除去阻礙檢測物質(zhì)的前處理。

　　　 ?與HPLC法、其他公司的同類產(chǎn)品相比，操作更簡單。

　　　 ?可以快速、精準(zhǔn)度高地檢測組胺。

　　　 ?與HPLC法有著很高的相關(guān)性。

Q2：　需要什么儀器或器具？

A2：　必需：組胺檢測試劑盒（顯色法檢測組胺），分光光度計。

　　　 其他：請閱讀說明書的第一頁右下角（試劑盒所需的器具）。

　　　 注意：請使用塑料器具。因為組胺會附著在玻璃上。

Q3：　一般的分光光度計也可以檢測嗎？

A3：　可以。但需要是可以檢測460nm上下的吸光度的分光光度計。

　　　 注意：推薦使用的分光光度計（分光光度計BABS-B470，共立理化學(xué)研究所公司所制）的光路是2cm。

　　　 如果使用光路是1cm的分光光度計，一旦超出組胺的檢測界限，標(biāo)準(zhǔn)溶液的檢測值也會變化。

　　　 詳情請閱讀說明書：第一頁左方— [試劑盒性能] 和 第2頁右方—5）標(biāo)準(zhǔn)值的檢測。

◆關(guān)于顯色法組胺檢測試劑盒

Q1：　顯色法檢測組胺試劑盒的檢測濃度范圍？

A1：　使用推薦的分光光度計B：可以檢測的組胺濃度是0.4-6ppm。如果是檢測生魚，罐頭魚等，將樣品稀

　　　 釋25倍，再換算樣品的濃度，可以檢測組胺的范圍是10-150ppm。

　　　 光路長1cm的分光光度計：可以檢測的組胺濃度是0.8-12ppm。

　　　 如果是檢測生魚，罐頭魚等，將樣品稀釋25倍，再換算樣品的濃度，可以檢測組胺的范圍是

　　　 20-300ppm。

　　　 此外，若樣本的組胺濃度超過檢測范圍的話，可以稀釋樣本后，再檢測。

Q2：　1盒顯色法組胺檢測試劑盒可以檢測多少個樣本？

A2：　本試劑盒可以檢測60次。但是，在實際的檢測中，每進(jìn)行一次連續(xù)的檢測，就需要檢測一次標(biāo)準(zhǔn)值。因

　　　 此根據(jù)每次連續(xù)檢測的樣本數(shù)的不同，一個試劑盒可以檢測的樣本數(shù)也不同。

　　　 例如：

　　　 如果一次的檢測就把試劑盒用完的話，除去檢測一次標(biāo)準(zhǔn)值之外，實際可以的樣本數(shù)為59個。

　　　 如果每次檢測的樣本數(shù)為5個的話，再加上每次都需要檢測一次標(biāo)準(zhǔn)值。實際可以檢測的次數(shù)為10次，即

　　　 可以檢測的樣本數(shù)為50個。

　　　 注意：在一次連續(xù)的檢測中，將沒用完的冷凍、冷藏后的試劑替換成新的試劑時候，請再次重新檢測標(biāo)準(zhǔn)

　　　 值。

Q3：　如果沒有可以調(diào)制組胺提取溶液的設(shè)備，可以買其他的代替嗎？

A3：　不好意思，無法提供組胺提取液的購買。若調(diào)制溶液時遇到問題，可以使用其他替代品，詳情請咨詢金畔。

Q4：　如何保存溶解后剩下的顯色試劑？

A4：　最好可以一次性用完溶解后的顯色試劑。

　　　 如果真的用剩了，請在按以下方法進(jìn)行保存：

　　　 冷藏：2～8℃，可保存一周

　　　 冷凍：-10℃以下，可保存一個月。

　　　 在以上保存的情況下，凍結(jié)溶解操作只可進(jìn)行3次。

　　　 （詳情請閱讀說明書第二頁左方 “2.試劑的調(diào)制（顯色試劑）”）

　　　 解凍時，請在流水中快速進(jìn)行。解凍完請一定要冷卻后再使用。

Q5：　如何保存溶解后剩下的酶試劑？

A5：　最好可以一次性用完溶解后的酶試劑。

　　　 如果真的用剩了，請在按以下方法進(jìn)行保存：

　　　 冷凍：-10℃以下，可保存一個月。凍結(jié)溶解操作只可進(jìn)行3次。（詳情請閱讀說明書第二頁左方 “2.試劑

　　　 的調(diào)制（酶試劑）”）

　　　 還有，當(dāng)用完冷凍溶解后的酶試劑后，換成新的酶試劑時，請重新檢測標(biāo)準(zhǔn)值。

◆關(guān)于從樣本中提取組胺

Q1：　為什么從活魚提取組胺時，需要進(jìn)行煮沸處理？

A1：　因為組胺是存在于魚肉成分(肌肉蛋白、油等)中，所以加熱后再提取，效率更高。而罐頭類食品本身已經(jīng)過

　　　 加熱處理了，提取時不需要再煮沸。

Q2：　如果不能立刻檢測樣本，或者是已提取了組胺的樣本的話，應(yīng)該怎樣做？

A2：　活魚：請冷凍保存。保存方法沒有什么需要注意的點，不過為避免解凍時的酶反應(yīng)發(fā)生得太快，請盡快完

　　　 成解凍。

　　　 ?經(jīng)過煮沸提取組胺，再過濾后的樣本，可以進(jìn)行放入冷藏、冷凍格里保存。

　　　 ?組胺提取沒有經(jīng)過煮沸的樣本，以及對樣本進(jìn)行前處理的時候，由于樣本中含有酶，需要進(jìn)行冷凍。解

　　　 凍的時候，如果有沉淀物出現(xiàn)的話請用濾紙等進(jìn)行除去。

Q3：　聽說樣本中含有雜質(zhì)時，是不能進(jìn)行檢測的。那么雜質(zhì)是什么物質(zhì)？

A3：　影響組胺檢測試劑盒反應(yīng)的雜質(zhì)是氧化還原物質(zhì)。

　　　 魚粉：飼料不新鮮時，由此而增殖的微生物形成的氧化還原物質(zhì)就是雜質(zhì)。

　　　 罐頭：調(diào)味料可能具有氧化還原能力。

 

Q4：　如果樣本有雜質(zhì)，檢測值是偏高還是偏低？

A4：　如果還原物質(zhì)多的話，檢測值會偏高，如果氧化物質(zhì)多的話，檢測值會偏低。因此檢測值是偏高還是偏低，

　　　 是根據(jù)兩種物質(zhì)的比例來決定的。氧化還原物質(zhì)是抗氧化物質(zhì)（維生素和細(xì)胞色素等）或者是氧化物質(zhì)，在

　　　 食品中以多種類的方式存在，因此無法確認(rèn)是哪個種類物質(zhì)造成的影響。

Q5：　如何知道樣本中是否含有雜質(zhì)？

A5：　對新的食品進(jìn)行組胺檢測時，可以在樣本添加定量的組胺，然后進(jìn)行檢測（添加回收實驗）。由此可以知道

　　　 是否有雜質(zhì)的影響，以及是否需要進(jìn)行前處理。

Q6：　是否有排除雜質(zhì)影響的方法？

A6：　魚肉、金槍魚罐頭、魚醬油等食品，只要按照說明書操作（一般的操作的提取、檢測），是可以除去雜質(zhì)的

　　　 影響。

　　　 但是，如果使用一般方法，也不能排除雜質(zhì)影響的話，可以通過稀釋樣品或固相萃取柱將氧化還原物質(zhì)進(jìn)行

　　　 前處理。（詳情請咨詢金畔）

◆關(guān)于檢測值有誤的問題

Q1：　標(biāo)準(zhǔn)溶液的數(shù)值偏低。

A1：　如果使用了溶解后再保存的酶溶液，因為在保存情況下酶活性降低，標(biāo)準(zhǔn)值可能也會降低。但只要達(dá)到正常

　　　 數(shù)值（0.85）的80%以上，檢測就沒有問題。

　　　 注意：使用光路為1cm的光度計的時候，檢測值達(dá)到一半以上即可（0.5左右）。（詳情請閱讀說明書：第

　　　 二頁右方檢測5）

Q2：　樣本的組胺量比實際要低。

A2：　?樣本的均化沒有很好地進(jìn)行。

　　　 （如果樣本的均化沒有很好地進(jìn)行，將無法完全地提取組胺）

　　　 ?樣本中含有雜質(zhì)（參考Q.如果樣本有雜質(zhì)，檢測值是偏高還是偏低？）

 

Q3：　樣本的組胺濃度超出檢測界限。

A3：　稀釋組胺提取液后，再次檢測。計算出組胺濃度時，注意要考慮稀釋倍數(shù)，再進(jìn)行計算。

Q4：　計算樣本的組胺量后，得到負(fù)數(shù)。

A4：　該樣本的組胺量，在檢測范圍的10ppm以下。（使用推薦的儀器分光光度計B的情況下）

　　　 得到負(fù)數(shù)的原因：

　　　 ?樣本中不存在組胺。

　　　 ?組胺濃度在檢測范圍以下時，因有檢測誤差，計算樣本檢測值和樣本空白值的差值，得到負(fù)數(shù)。

　　　 推薦儀器（分光光度計B）的檢測范圍的下限是10ppm。因此，得到負(fù)數(shù)是因為，樣本的組胺濃度會出現(xiàn)

　　　 10ppm以下。

Q5：　檢測完的反應(yīng)液在放置一陣之后，再次檢測后發(fā)現(xiàn)，檢測值變高。那么，哪個數(shù)值才是正確？

A5：　反應(yīng)結(jié)束后的檢測值是正確的。

　　　 試劑盒的顯色試劑，是通過陽光來顯色的。如果把反應(yīng)液放置在有陽光照射的地方，檢測值會變高。因此，

　　　 反應(yīng)結(jié)束后，請迅速進(jìn)行檢測。

Q6：　活的紅身魚在常溫下放置了幾天。檢測后發(fā)現(xiàn)，魚中并不含有組胺。

A6：　紅身魚（金槍魚，秋刀魚，鰹魚，竹莢魚，青花魚等）等含有大量的組氨酸的食物，若被組胺菌污染的話，

　　　 會產(chǎn)生組胺。因此，還未被組胺菌污染的紅身魚即使腐爛了，也不會被檢出組胺。