GenomONE™-Neo EX 仙臺(tái)病毒包膜轉(zhuǎn)染試劑

可用于DNA、siRNA、ODN及蛋白轉(zhuǎn)染！

◆原理：

　　待轉(zhuǎn)移的分子（如DNA，蛋白，Antisense Oligonucleotide, siRNA等）與HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后，形成了HVJ-E載體。利用病毒衣殼蛋白的侵染能力，在融合蛋白(F)的作用下，直接與細(xì)胞融合，將分子轉(zhuǎn)入目標(biāo)細(xì)胞或組織。

　　*　HVJ-E：Hemagglutinating Virus of Japan Envelope。

　　** 現(xiàn)已有200多篇文獻(xiàn)使用該試劑盒，如需樣本案例，請(qǐng)向我司索取。

◆優(yōu)點(diǎn)、特色：

      目前市面上獨(dú)一無(wú)二的轉(zhuǎn)染試劑盒，可用于細(xì)胞、組織和活體動(dòng)物?？捎糜冢?

siRNA
      少量siRNA也可高效發(fā)揮敲除作用，無(wú)需化學(xué)修飾siRNA，高表達(dá)量。
DNA
      無(wú)論序列長(zhǎng)短、線性或環(huán)狀均可
Oligonucleotides
      DNA, RNA
蛋白
      保持酶和抗體的功能性與特異性
體內(nèi)轉(zhuǎn)染 !!
      大量操作和文獻(xiàn)引用證明HVJ-E載體可直接將目標(biāo)分子轉(zhuǎn)移到活體動(dòng)物產(chǎn)生作用。
高通量篩選
      可同時(shí)轉(zhuǎn)染多種分子

1.　運(yùn)用范圍廣
     GenomONE HVJ-E載體試劑盒可將多種分子（質(zhì)粒DNA、siRNA、寡核苷酸、蛋白、抗體等）轉(zhuǎn)進(jìn)培養(yǎng)細(xì)胞（貼壁和非貼壁細(xì)胞）和組織。也可用于敏感原代細(xì)胞和 活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染。每種領(lǐng)域的GenomONE-Neo運(yùn)用情況，均有大量文獻(xiàn)報(bào)道。（如需文獻(xiàn)列表，請(qǐng)向我司索?。?

2.　安全性
     與陽(yáng)離子脂質(zhì)體不同，GenomONE-Neo是通過(guò)膜融合作用將分子導(dǎo)入細(xì)胞，而脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的內(nèi)吞作用可能造成轉(zhuǎn)染分子經(jīng)溶酶體作用而降解。GenomONE-Neo 內(nèi)含完全滅活的HVJ病毒顆粒，其具有侵染力而無(wú)潛在增殖能力，使用非常安全，無(wú)需特殊的防護(hù)措施      

3.　方便簡(jiǎn)單
     GenomONE 即開(kāi)即用，試劑盒內(nèi)包含了操作中主要使用的HVJ-E凍干粉和各種輔助試劑      

 

◆案例、應(yīng)用：

　　GenomONE™-Neo和傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和電穿孔法相比，有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性，可更有效的發(fā)揮siRNA的knock-down作用。

■ in vivo

【大鼠頜下腺逆行注射siRNA】

　　Ca²⁺-dependent Cl channel protein (rCLCA)表達(dá)的特異性抑制。

免疫染色

　　　　　　

　　　non-injection side   　　　　　　　　　　　　　　rCLCA siRNA-injection side

　　rCLCA siRNA（2 nmol）和GenomONE-Neo（2AU）混合后，以逆行注射的方式注入大鼠頜下腺。四十八小時(shí)后，用免疫染色檢驗(yàn)siRNA注射對(duì)氯離子通道蛋白表達(dá)的抑制作用。
　　ST：紋狀管，G：顆粒曲管，A：腺泡

　　【相關(guān)文獻(xiàn)】

　　K. Ishibashi et al., J. Dent. Res., 85(12), 1101-1105 (2006).

■ in vitro

【難轉(zhuǎn)染細(xì)胞——U937細(xì)胞RNAi】

　　總所周知，用脂質(zhì)體和電轉(zhuǎn)的方法將siRNA轉(zhuǎn)到U937人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞中非常困難，但我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，siRNA與GenomONE-Neo結(jié)合后轉(zhuǎn)染該細(xì)胞，其knock-down效率可達(dá)85%以上。

♦ U937細(xì)胞經(jīng)siRNA轉(zhuǎn)染72小時(shí)后收集，用RT-PCR和WB分別檢測(cè)mRNA和蛋白量的變化情況。

Real-time PCR　　　　　　　　　　　　　　　　　　Western blotting

　　　　　　

　　左圖：轉(zhuǎn)染Cathepsin G的特異性siRNA后，其對(duì)應(yīng)的mRNA減少到14%

　　右圖：轉(zhuǎn)染Cathepsin G的特異性siRNA后，其蛋白水平減少到15%

　【相關(guān)文獻(xiàn)】 
　　Y. Tsuchiya et al, Free Radical Biology & Medicine, 43, 1604-1615 (2007).

◆試劑盒組成：

Cat.  #	Freeze-dried HVJ-E (inactivated   HVJ)   0.26 mL /vial   (when reconstituted)	Reagent A (enhancer   for incorporation)   0.5 mL/vial	Reagent B (reagent   for    incorporation)   0.3 mL/vial	Reagent C (enhancer   for introduction)   1.0 mL/vial	Buffer (for   suspension    and dilution)   6.5 mL/vial
ISK-GN-001–EX	1  vial	1  vial	1  vial	1  vial	1  vial
ISK-GN-004–EX	4  vials	1  vial	1  vial	1  vial	1  vial
ISK-GN-040-EX	40  vials	10  vials	10  vials	10  vials	10  vials

【相關(guān)資料】

GenomONE-Neo EX 操作手冊(cè)

GenomONE siRNA案例

GenomONE(TM)-Neo EX HVJ-E Transfection Reagents產(chǎn)品說(shuō)明書

轉(zhuǎn)染專題宣傳單頁(yè)

同系列相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	應(yīng)用
ISK-AB001-EX	GenomONE™-Cab EX 1 vial Antibody Delivery  Reagents	1 set	IgG抗體轉(zhuǎn)染
ISK-CF-001-EX	GenomONE™ -CF EX SeV-E（HVJ-E）1 vail Cell Fusion Reagents	1 set	細(xì)胞融合試劑

請(qǐng)參考附件：

GenomONE-Neo EX 常見(jiàn)問(wèn)題1.pdf

GenomONE-Neo EX_問(wèn)題解決指南1.pdf

參考文獻(xiàn)

[1]	Different effect of resveratrol to induction of   apoptosis depending on the type of human cancer cells.
	Takashina M, Inoue S, Tomihara K, Tomita K, Hattori K, Zhao QL, Suzuki T,   Noguchi M, Ohashi W, Hattori Y. Int J Oncol. 2017 Mar;50(3):787-797. PMID: 28197625
[2]	Protein Transfection ( in vitro / in vivo ) / Peptide   Transfection ( in vitro )
	Directly reprogramming fibroblasts into adipogenic,   neurogenic and hepatogenic differentiation lineages by defined factors. Wu W, Jin YQ, Gao Z. Exp Ther Med. 2017 Jun;13(6):2685-2690. PMID: 28587331
[3]	siRNA Transfection ( in vitro / in vivo) / miRNA   Transfection ( in vitro )
	Impaired Dual-Specificity Protein Phosphatase DUSP4   Reduces Corticosteroid Sensitivity. Kobayashi Y, Ito K, Kanda A, Tomoda K, Mercado N, Barnes PJ. Mol Pharmacol. 2017 May;91(5):475-481. PMID: 28283554
[4]	siRNA Transfection ( in vitro / in vivo) / miRNA   Transfection ( in vitro )
	AIM2 Inflammasome Is Critical for Influenza-Induced   Lung Injury and Mortality Zhang H, Luo J, Alcorn JF, Chen K, Fan S, Pilewski J, Liu A, Chen W, Kolls   JK, Wang J. J Immunol. 2017 Jun 1;198(11):4383-4393. PMID: 28424239
[5]	siRNA Transfection ( in vitro / in vivo) / miRNA   Transfection ( in vitro )
	Human monocytes downregulate innate response receptors   following exposure to the microbial metabolite n-butyrate Lasitschka F, Giese T, Paparella M, Kurzhals SR, Wabnitz G, Jacob K, Gras J,   Bode KA, Heninger AK, Sziskzai T, Samstag Y, Leszinski C, Jocher B, Al-Saeedi   M, Meuer SC, Schroder-Braunstein J. Immun Inflamm Dis. 2017 Jul 6. PMID: 28681454
[6]	siRNA Transfection ( in vitro / in vivo) / miRNA   Transfection ( in vitro )
	Inhibition of TrkB limits development of the zebra   finch song system. Beach LQ, Tang YP, Kerver H, Wade J. Brain Res. 2016 Jul 1;1642:467-477. PMID: 27086969
[7]	Plasmid DNA Transfection ( in vivo / in vitro )
	High-efficiency generation of induced pluripotent   mesenchymal stem cells from human dermal fibroblasts using recombinant   proteins Chen F, Zhang G, Yu L, Feng Y, Li X, Zhang Z, Wang Y, Sun D, Pradhan S. Stem Cell Res Ther. 2016 Jul 30;7(1):99. PMID: 27473118
[8]	siRNA Transfection ( in vitro / in vivo) / miRNA   Transfection ( in vitro )
	Netrin-1 prevents the development of cardiac   hypertrophy and heart failure. Wang N, Cao Y, Zhu Y. Mol Med Rep. 2016 Mar;13(3):2175-81. PMID: 26783193

請(qǐng)參考附件：

GenomONE_參考文獻(xiàn)_體外實(shí)驗(yàn).pdf

GenomONE_參考文獻(xiàn)_體內(nèi)實(shí)驗(yàn).pdf