BlotGlyco^? 糖鏈純化試劑盒

　　簡便快速多糖純化和標記的試劑盒，用于高通量和重復性的糖基化分析。

 

◆試劑盒內(nèi)容

●　 BlotGlyco^? 和用于MALDI-TOF質(zhì)譜標記的試劑

●　 專門設計的反應管（離心管）

●　 用于除去多余標記試劑的清洗柱

●　 樣品管

●　 說明書

◆特點

可以從多重未經(jīng)處理的生物樣品中純化與標記糖鏈

●　只需一個反應管，5小時左右即可完成純化和標記。

●　除了一個微量恒溫儀和一個小型離心機，不需要其他特殊設備。

●　可使用2AB和PA等傳統(tǒng)的熒光標記試劑。

●　試劑盒含有的獨特標記試劑（aoWR），適合高靈敏的MALDI-TOF質(zhì)譜分析。

●　可用on-bead簡單保護MALDI-TOF Ms檢測的唾液酸。

◆原理

　　BlotGlyco^? 是化學合成的高分子顆粒，BlotGlyco^? 的高密度酰肼基團可特異性地結(jié)合多糖降解端的醛基，所以BlotGlyco^? 可從不同的生物樣品中選擇并全面捕獲多糖。酰肼基團可與醛基穩(wěn)定結(jié)合，因此洗脫后就能很容易地除去肽和其他雜質(zhì)。

◆操作步驟

◆用途

藥物開發(fā)研究和生物工程研究

糖鏈分析

●　生物制藥的糖基化分析：研究開發(fā)，質(zhì)量管理，工藝管理。

●　細胞糖鏈分析：干細胞分化引起的糖鏈變化研究。

●　生物標志物探索：血清等活體樣本的大規(guī)模糖鏈分析。

●　蛋白質(zhì)組學融合：電泳條帶中的糖鏈分析。

 

◆實驗案例

生物制藥的糖基化分析

抗體的N型糖鏈：使用10μg IgG

生物標記物的探索

人血清N型糖鏈：使用5μL血清

BlotGlyco^? O-Glycan樣品制備試劑盒.pdf

Q&A

Q：哪些樣本可進行糖鏈分析？

A：除了純化的糖蛋白以外，血清、血漿、細胞、組織、電泳凝膠等均可進行糖鏈分析。

Q：可否從樣本中特定蛋白質(zhì)捕獲純化的糖鏈？

A：需要運用免疫沉降和SDS-PAGE等分離目的蛋白質(zhì)。CBB染色條帶可從電泳后的凝膠可直接捕獲純化的糖鏈。

Q：樣品量需要多大可進行糖鏈分析？

A：運用Bovine IgG實驗，1μ水平即可進行N型糖鏈分析。如果是細胞，需要準備最低水平1×10⁶個。

Q：一個實驗的磁珠能捕獲多少糖鏈？

A：在麥芽庚糖實驗中，已確認能捕獲糖鏈的定量范圍在2pmol～100nmol。

Q：糖鏈的回收率在什么水平？

A：大約在60～70%水平。已確認糖鏈的分子量、支化度、終端巖藻糖有無不會對回收率產(chǎn)生影響。但是還原末端的糖種類會對回收率產(chǎn)生影響。詳細請咨詢

Q：只能捕獲特定的糖鏈嗎？

A：本產(chǎn)品能捕獲純化具有還原端的全部糖鏈。對于捕獲特定糖鏈的情況，需另外進行不同的分離純化步驟。

Q：試劑盒中含有糖鏈切除用酶嗎？

A：不含有糖鏈切除用酶。請客戶自行準備PNGaseF等酶。操作說明手冊有記載推薦產(chǎn)品。

Q：試劑盒中含有標識用試劑嗎？

A：MALDI-TOF MS用標識試劑與試劑盒試劑捆綁。試劑盒中不含有PA和2AB等熒光標識試劑，需客戶自備。操作說明手冊有記載推薦產(chǎn)品。

Q：可回收未標識的糖鏈嗎？

A：可以。使用本產(chǎn)品的客戶可者提供參考操作手冊，詳情請咨詢。

Q：本產(chǎn)品能捕捉純化糖蛋白和糖肽嗎？糖鏈結(jié)合位置可識別嗎？

A：因為本試劑盒使用方法不能純化糖蛋白和糖肽，所以糖鏈結(jié)合位置識別困難。相關技術正在開發(fā)當中，有興趣者請咨詢。

Q：O型糖鏈和糖脂糖鏈、蛋白多糖等也可進行糖鏈分析嗎？

A：已有各種廣泛的應用。詳情請咨詢。

Q：BlotGlyco^? 有效期？

A：生產(chǎn)日期起一年有效。