mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基/mESF添加物

用于小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基

　　本產(chǎn)品是用于小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基。只需在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加mESF添加物和LIF后即可進(jìn)行小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)。使用時(shí)無需添加FBS或血清代替品，同時(shí)無需使用飼養(yǎng)層細(xì)胞。

◆產(chǎn)品

　　●　mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基（編號(hào)No. 136-17805）

　　●　mESF添加物（編號(hào)No. 299-73301）

　　　　mESF Supplement A 5ml×1
　　　　mESF Supplement B 5ml×1（含有0.0078% 2-mercaptoethanol）

◆特點(diǎn)

　　●　無需FBS和血清代替品（無血清培養(yǎng)基）

　　●　無需飼養(yǎng)層細(xì)胞

　　●　低濃度LIF下也能維持未分化能力

◆使用方法

　　●　往mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基全量加入各種mESF Supplement及LIF。

※注　直接將mESF從現(xiàn)在使用中的培養(yǎng)基移出時(shí)，成功移植細(xì)胞數(shù)量有可能性減少。因此，請(qǐng)播種比移植時(shí)更多的細(xì)胞。此外，若不擅長(zhǎng)直接移植，請(qǐng)按照以下順序進(jìn)行馴化。

　　①播種細(xì)胞時(shí)，將使用中的培養(yǎng)基與mESF培養(yǎng)基以1:1的比例混合。

　?、谠诤竺娴囊浦搽A段，將使用中的培養(yǎng)基與mESF培養(yǎng)基以1:3、 1:7的比例混合，依次增加mESF培養(yǎng)基的用量。

 

◆小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系的培養(yǎng)

　　使用本產(chǎn)品培養(yǎng)小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系傳代至第5代，觀察到細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞繁殖能力、未分化標(biāo)記物。

◆細(xì)胞形態(tài)

　　觀察到具有小鼠ES細(xì)胞特有光澤的細(xì)胞集落。

◆細(xì)胞繁殖曲線

 

　　使用本產(chǎn)品后的繁殖曲線如下圖。

（培養(yǎng)基組成）
　?。鞥SF基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 各mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure? LIF

（細(xì)胞播種數(shù)）

　　7,000cells/well　

（使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板）　

◆觀察到未分化標(biāo)記物

　　各種未分化標(biāo)記物（Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1）呈陽性。

 

 ◆低濃度LIF下的小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系培養(yǎng)

　　在低濃度LIF下（250, 500units/ml）培養(yǎng)了小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系。

◆集落形態(tài)（ALP染色）?細(xì)胞繁殖曲線

　　細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞繁殖曲線如下圖。 

 

（培養(yǎng)基組成）

　?。鞥SF基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure? LIF

（細(xì)胞播種數(shù)）

　　7,000cells/well　

（使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板）　

◆ALP染色陽性集落形成率

　　任何LIF濃度下的集落ALP染色幾乎都呈陽性。

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

★StemSure^? 系列★

　　StemSure^?系列可用于ES細(xì)胞、iPS細(xì)胞培養(yǎng)。對(duì)每批小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。

　　●StemSure^?D-MEM?巰基乙醇?硫代甘油

　　●StemSure^?血清代替品

　　●StemSure^?明膠溶液

　　●StemSure^?冷凍保存溶液

 

★培養(yǎng)基?細(xì)胞培養(yǎng)試劑★

　　本公司生產(chǎn)液體培養(yǎng)基以及平衡鹽溶液、細(xì)胞剝離?分散溶液、抗生物質(zhì)溶液、細(xì)胞外基質(zhì)。<鏈接>

★ES?iPS細(xì)胞研究試劑★ 
 
　　2007年公布iPS細(xì)胞建立后，出現(xiàn)了大量關(guān)于iPS細(xì)胞的文獻(xiàn)。在眾多文獻(xiàn)中，列出了有關(guān)ES細(xì)胞?iPS細(xì)胞的未分化能維持及分化誘導(dǎo)的低分子化學(xué)物。<鏈接> 

★L(fēng)IF, 人類, 移植體, 培養(yǎng)上清液★

　　LIF對(duì)小鼠ES細(xì)胞分化有抑制作用，因此可在維持未分化狀態(tài)下的ES細(xì)胞時(shí)使用。<鏈接>

★rBC2LCN-FITC★

　　rBC2LCN能夠辨識(shí)未分化的人類ES?iPS細(xì)胞。可添加含有人類ES?iPS細(xì)胞的培養(yǎng)液，對(duì)未分化的活細(xì)胞進(jìn)行染色。<鏈接>

 

◆參考文獻(xiàn)

• Furue, M., et al.: In Vitro Cell Dev. Biol. Anim., 41, 19-28, (2005).

• Hayashi,Y., et al.: Stem Cells, 25, 3005-3015, (2007).