組織分散酶 DISPASE^? I、DISPASE^? II

　　DISPASE^? 是切斷肽鏈的中性、非極性氨基酸N 末端的金屬蛋白酶，能夠把上皮細胞從組織上剝離成片狀。以前技術(shù)人員一直把它用于原代培養(yǎng)的細胞分離以及分散。近年，在再生醫(yī)學(xué)和組織工程的領(lǐng)域上也有廣泛應(yīng)用，可以和膠原酶配合使用。此酶分離細胞迅速有效又溫和，細胞能保持完整，不會給細胞膜帶來傷害，無動物源原料，不含支原體或動物病毒污染，對于血清成分、酶濃度、處理事件、溫度、pH非常穩(wěn)定。

	DISPASE?Ⅰ	DISPASE? Ⅱ
特性	結(jié)晶酶，無菌產(chǎn)品	粉末酶，非無菌產(chǎn)品
包裝	6小瓶	1g
酶活性	10,000-13,000 PU/小瓶	300,000-360,000 PU/g
添加劑等	含有醋酸鈣	含有糊精和醋酸鈣
儲存·有效期	生產(chǎn)后在2～10℃下可儲存2年（未開封）； 　開封溶解后請凍存在-20℃以下，并在6個月內(nèi)使用。

◆優(yōu)點、特色

●  DISPASE^? 是來源于Paenibacillus sp. （舊名：Bacillus polymyxa ）的中性金屬蛋白酶?；钚灾行?/span>

　　　  有Zn²⁺，比Ca²⁺ 穩(wěn)定。

●  酶活性幾乎不受血清成分影響，因此不論是否有血清，都可以使用本產(chǎn)品。同時可簡單地通過添加EDTA

　        或者稀釋反應(yīng)液來停止酶反應(yīng)。

●  可以很好地分解構(gòu)成基底膜的Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白，讓上皮細胞從組織上剝離成片狀。

●  與胰蛋白酶、膠原酶等蛋白酶的作用不同，造成的細胞損傷更少，可溫和地分散細胞。

●  由于作用條件的范圍廣泛，可以在不同的酶濃度、處理時間、溫度以及pH 條件下，使酶發(fā)生作用。

●  細胞培養(yǎng)溫度一般在37℃，酶在此溫度下非常穩(wěn)定。根據(jù)細胞種類的不同，可以往培養(yǎng)基里添加本產(chǎn)品，

　         進行懸浮培養(yǎng)。

●  本產(chǎn)品不含支原體。

●  本產(chǎn)品沒有使用動物源原料。

◆案例、應(yīng)用

酶濃度	100 ～ 2,000 PU/mL
溶解液	含有Ca2+ 的緩沖液或者培養(yǎng)基（可含有血清）
反應(yīng)時間	30 分鐘～幾天
反應(yīng)溫度	室溫～ 37℃
反應(yīng)pH	6.5 ～ 9.0
抑制因子	EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+

 

※ 1PU 的定義是使用酪蛋白分解法1 分鐘內(nèi)分離1 微克酪氨酸的酶活性。

◆資料

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1. Matsumura T, et al. Jpn. J. Exp. Med. 45, 377-382 (1975).

2. Matsumura T, et al. Jpn. J. Exp. Med. 45, 383-392 (1975).

3. Rheinwald JG, et al. Cell. 6, 317-330 (1975).

4. Green H, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 76, 5665-5668 (1979).

5. Kawakita T,et al. Invest. Ophthalmol. vis. Sci. 50, 4611-4617 (2009).

6. Kitano Y, et al. Br J Dermatol. 108, 555-560 (1983).

7. Thomson J.A, et al. Science. 282, 1145-1147 (1998).

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