多藥耐藥性綠膿菌(Multiple – Drug – ResistantPseudomonas aeruginosa:MDRP),是主要的抗生素對獲得了廣泛耐藥性綠膿菌,分離報(bào)告和院內(nèi)感染的事例,各地的醫(yī)療設(shè)施多被報(bào)告。
愛知縣衛(wèi)生研究所的鈴木匡弘老師和金澤醫(yī)科大學(xué)的老師們由嗣飯沼開發(fā)的PCR -根據(jù)ORF Typing(POT)法,多路PCR用綠膿桿菌中的多數(shù)特定基因領(lǐng)域進(jìn)行放大、瓊脂糖凝膠電泳增幅被的樂隊(duì)圖形分析方法。
這個(gè)方法的基礎(chǔ)上,本試劑盒,綠膿菌基因領(lǐng)域的符號簡便數(shù)值化的可能。
脈沖電場凝膠電泳(PFGE)和Multilocus Sequence Typing(MLST)法和同等的識別能力具有。
*參考:厚生勞動(dòng)省科學(xué)研究費(fèi)補(bǔ)助金新型流感等新興·復(fù)興感染癥研究事業(yè),新型耐藥性菌関研究平成23年度總結(jié)·分擔(dān)研究報(bào)告,研究代表荒川宜親
特長
約4小時(shí)的分子疫學(xué)分析可能
脈沖電場凝膠電泳(PFGE)不同的通用設(shè)備測定可能
解析結(jié)果數(shù)值化(POT值)的事,菌體間的相比較可能同性
配套元件的構(gòu)成
|
個(gè)別名稱 |
容量 |
數(shù)量 |
試劑A |
AptaTaq DNA主人(5×Conc .)* |
500μL |
一本書 |
試劑B |
PCR附錄 |
500μL |
一本書 |
試劑C |
引物混合α |
250μL |
一本書 |
試劑D |
混合β引物 |
250μL |
一本書 |
試劑E |
積極控制 |
250μL |
一本書 |
試劑F |
6×裝入緩沖區(qū)(BPB·XC) |
500μL |
一本書 |
* AptaTaq DNA主人(5×Conc設(shè)置Roche Diagnostics K . K .的商品。
操作步驟
① |
綠膿菌塊兒的(培養(yǎng)) |
② |
DNA抽出,進(jìn)行模板DNA制備 |
③ |
兩種多路PCR |
④ |
瓊脂糖凝膠電泳 |
⑤ |
樂隊(duì)的讀取模式 |
差 |
POT值的計(jì)算 |
⑦ |
各樣品的POT值的比較分析 |
解析
電泳模式
50 : 50個(gè)基點(diǎn)DNA梯形P:積極的控制1:ATCC?278532:ATCC?355543:PAO 14:IMP陽性臨床分離股票5:VIM陽性臨床分離股票6:臨床分離股票7,8:集體感染事例1中所得到的臨床分離股票9,10:集體感染的事例2從中得到的臨床分離股票
泳動(dòng)條件,是4%瓊脂糖KANTO A的酒館熊貓聚會(0.5×TBE緩沖液),電泳裝置用,120 V 50分鐘。25孔的梳子,用樣品3μL電器了泳動(dòng)了。
檢測ORF的種類(目標(biāo)區(qū)域)及其PCR擴(kuò)增產(chǎn)物尺寸
|
POT No . |
放大尺寸(bp) |
目標(biāo)領(lǐng)域 |
Reactionmixture 1 |
PCR PC |
506 |
positive control <em>aeruginosa P .</em> |
POT 1 – 1 |
336 |
Genomic Islet – 1 |
POT 1 – 2 |
281 |
Genomic Islet – 2 |
POT 1 – 3 |
235 |
Genomic Islet – 3 |
POT 1 – 4 |
201 |
Genomic Islet – 4 |
POT 1 – 5 |
175 |
Genomic Islet – 5 |
POT 2 – 1 |
151 |
VIM |
POT 2 – 2 |
126 |
職業(yè)噬菌體- 1 |
POT 2 – 3 |
103 |
職業(yè)噬菌體- 2 |
POT 2 – 4 |
85 |
職業(yè)噬菌體- 3 |
Reactionmixture 2 |
PCR PC |
506 |
positive control <em>aeruginosa P .</em> |
POT 1 – 6 |
324 |
Genomic Islet – 6 |
POT 1 – 7 |
271 |
Genomic Islet – 7 |
POT 1 – 8 |
238 |
Genomic Islet – 8 |
POT 1 – 9 |
204 |
Genomic Islet – 9 |
POT 1 – 10 |
176 |
Genomic Islet – 10 |
POT 2 – 5 |
150 |
職業(yè)噬菌體- 4 |
POT 2 – 6 |
124 |
職業(yè)噬菌體- 5 |
POT 2 – 7 |
105 |
IMP |
PCR PC,綠膿桿菌檢測用的PCR積極控制指。
①2個(gè)多路PCR的電泳結(jié)果從樂隊(duì)讀取模式。
②這電泳樂隊(duì)的有無的結(jié)果用,POT值分析用EXCEL表二進(jìn)法輸入,2個(gè)類別的POT值計(jì)算出。
無論P(yáng)CR電腦陽性的情況,那個(gè)樣品是綠膿菌,可以確認(rèn)。另外,MDRP的場合,POT 2的值的合計(jì)為64以上或奇數(shù)。
不論樣品之間的POT值進(jìn)行比較,菌體間的相同性客觀的推測。
在集體感染得菌身體,POT 1~2 POT值全部同一。
范疇 |
樣品號碼 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
POT 1 |
636 |
572 |
可以 |
646 |
207 |
887 |
410 |
410 |
646 |
646 |
POT 2 |
48 |
58 |
0 |
9 |
122 |
6 |
8 |
8 |
8 |
8 |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名 |
包裝 |
產(chǎn)品編號 |
鹿genius?分子疫學(xué)分析POT配套元件(綠膿菌用) |
一包(50次) |
08187 – 96 |
鹿genius?DNA抽出試劑 |
一包(120次) |
08178 – 96 |
最新的價(jià)格是Cica – Web請參照。
本試劑盒是從愛知縣專利許可,制造銷售。其他廠家的商品相關(guān)的許可證、專利方面,各廠商請確認(rèn)。
的相關(guān)產(chǎn)品
POT套件·PCR套件
最新的價(jià)格是Cica – Web請參照。
分離培養(yǎng)基
產(chǎn)品名 |
包裝 |
產(chǎn)品編號 |
黑藻アガーMDRP屏幕培養(yǎng)基 |
10張 |
72108 |
最新的價(jià)格是Cica – Web請參照。
電泳相關(guān)
產(chǎn)品名 |
包裝 |
產(chǎn)品編號 |
瓊脂糖KANTO A的酒館熊貓聚會了 |
100克 |
01089 – 23 |
10×TBE緩沖液 |
一L |
46510 : 79 |
溴化乙錠溶液(2毫克/毫升瓶裝),眼藥水 |
10毫升 |
14575 : 43 |
Quick‐Load Purple 50個(gè)基點(diǎn)DNA Ladder |
gel lanes 250 |
49914 : 40 |
6倍濃縮裝入緩沖器 |
2 mL×6本 |
24080 – 96 |
最新的價(jià)格是Cica – Web請參照。
宣傳手冊、說明書(PDF)
小冊子鹿genius?分子疫學(xué)解析配套元件(綠膿菌用)(399 KB)
小冊子鹿genius?POT套件系列(1.3 MB)
小冊子鹿genius?基因檢測試劑盒推薦組套(978 KB)設(shè)備
小冊子基因檢測相關(guān)產(chǎn)品指南(2.3 MB)
取扱說明書(971 KB)
計(jì)算表(ZIP文件,Excel)
POT值分析用EXCEL表(ZIP文件,522 KB)
的相關(guān)產(chǎn)品
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