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ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-
ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-
- 酸化ストレス関連試薬
- 蛍光色素
トータルROS検出キット
- トータルROSを高感度に検出
- 蛍光顕微鏡、プレートリーダー、フローサイトメーターで検出可能
-
製品コードR252 ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 100 tests | ￥18,000 | 340-09811 |
| 100 tests | ?Highly Sensitive DCFH-DA Dye ?loading Buffer (10x) |
10 ×l×1 1.0 ml×1 |
|---|
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マニュアル
-
取扱説明書
日本語 
-
取扱説明書 English
技術(shù)情報(bào)
既存試薬との比較
活性酸素種に対する反応選択性
Highly Sensitive DCFH-DAは活性酸素種（ROS）に対して、DCFH-DAと同様の反応性を示します。
また、DCFH-DAと同様の蛍光特性（λex：505 nm、λem：525 nm）を持つため、同じ勵(lì)起?蛍光波長での検出が可能です。
検出感度の比較
過酸化水素処理したHeLa細(xì)胞（1×104 cells/ml）をDCFH-DAまたはROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-で染色し、細(xì)胞內(nèi)ROSの検出能を比較しました。 結(jié)果、いずれの検出裝置においてもROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-ではDCFH-DAよりも高感度に細(xì)胞內(nèi)のROSを検出できました。
①蛍光顕微鏡での検出
※Highly Sensitive DCFH-DAの観察條件で比較
|
|
<検出條件>
GFPフィルター(Ex. 450 – 490 nm / Em. 500 – 550 nm)
細(xì)胞種：HeLa細(xì)胞
②蛍光プレートリーダーでの検出
<検出條件>
Ex. 490 – 520 nm / Em. 510 – 540 nm
細(xì)胞種：HeLa細(xì)胞
③フローサイトメーターでの検出
<検出條件>
FITC laser gain：215 V
細(xì)胞種：HeLa細(xì)胞
參考文獻(xiàn)
| 文獻(xiàn)No. | 対象サンプル | 裝置 | 引用（リンク） |
|---|---|---|---|
| 1) |
細(xì)胞 |
蛍光顕微鏡 | S. Kato, "Effects of platinum?coexisting dopamine with X?ray irradiation upon human glioblastoma cell proliferation", Hum. Cell, 2021, doi:10.1007/s13577-021-00591-3. |
| 2) |
細(xì)胞 |
蛍光顕微鏡 | K. Kanno, T. Sakaue, M. Hamaguchi, K. Namiguchi, D. Nanba, J. Aono, M. Kurata, J. Masumoto, S. Higashiyama, H. Izutani, "Hypoxic Culture Maintains Cell Growth of the Primary Human Valve Interstitial Cells with Stemness", Int. J. Mol. Sci. 2021, doi:10.3390/ijms221910534. |
| 3) |
細(xì)胞 |
フローサイトメーター | C. Fang, L. Wu, M. Zhao, T. Deng, J. Gu, X. Guo, C. Li, W. Li, X. Zeng, "Periodontitis Exacerbates Benign Prostatic Hyperplasia through Regulation of Oxidative Stress and Inflammation", Oxid. Med. Cell. Longevity, 2021, doi:10.1155/2021/2094665. |
| 4) | 菌 （Synechococcus elongatus PCC7942) |
プレートリーダー | M. Tamoi and S. Shigeoka, "CP12 Is Involved in Protection against High Light Intensity by Suppressing the ROS Generation in Synechococcus elongatus PCC7942", Plants, 2021, doi:10.3390/plants10071432. |
| 5) | 細(xì)胞 SW982(ヒト滑膜肉腫細(xì)胞株) |
蛍光顕微鏡 | S. Xia, Z. Ma, B. Wang, F. Gao, C. Yi, X. Zhou, S. Guo, L. Zhou, "In vitro anti-synovial sarcoma effect of diallyl trisulfide and mRNA profiling", Gene, 2021, doi:10.1016/j.gene.2021.146172. |
| 6) | 細(xì)胞 BRL3A(肝由來細(xì)胞株) |
蛍光顕微鏡 | Z. Luo, Q. Gao, H. Zhang, Y. Zhang, S. Zhou, J. Zhang, W. Xu, J. Xu, " Microbe-derived antioxidants attenuate cobalt chloride-induced mitochondrial function, autophagy and BNIP3-dependent mitophagy pathways in BRL3A cells", 2022, doi:10.1016/j.ecoenv.2022.113219. |
よくある質(zhì)問
-
Q
1キットで測定可能なサンプル數(shù)を教えてください。
-
A
測定可能なサンプル數(shù)は以下をご參考ください。
? 96-well plate：1枚
? ibidi 8-well plate：6枚
? 35 mm dish：5枚
? 6-well plate：5ウェル
-
Q
ポジティブコントロールになる実験例はありますか？
-
A
取扱説明書に過酸化水素処理をしたHeLa細(xì)胞による検出例を掲載しております。
-
Q
Highly Sensitive DCFH-DA working solutionはLoading Buffer以外でも調(diào)製できますか？
-
A
染色時(shí)の細(xì)胞へのダメージを軽減するため付屬のLoading Bufferを推奨しますが、Hanks’ HEPESやHBSSでも調(diào)製できます。
培地で調(diào)製する場合は無血清培地をご使用ください。
-
Q
染色後の洗浄には、HBSSの代わりにPBSを使用できますか？
-
A
細(xì)胞へのダメージを軽減するためHBSSを推奨しております。
HBSSがお手元にない場合は培地での洗浄をお?jiǎng)幛幛筏蓼埂?/p>
-
Q
蛍光顕微鏡でイメージングする際の注意點(diǎn)はありますか？
-
A
色素はROSと反応し、酸化することで蛍光を発します。
勵(lì)起光を照射し続けると色素が酸化されることでバックグラウンドが上昇するため、イメージング畫像を取得する際は明視野でピントを調(diào)整後に蛍光畫像を取得してください。
-
Q
フローサイトメーターで使用する際、細(xì)胞を剝がす操作はどの段階で行えば良いですか？
-
A
取扱説明書 操作6の後(薬剤処理しHBSSで洗浄した後)に細(xì)胞を剝がす操作(トリプシン処理)を行ってください。
トリプシン処理後は、培地を添加し反応を止めた後、遠(yuǎn)心しHBSSで１回洗浄後、
さらに遠(yuǎn)心しHBSSで細(xì)胞を懸濁して測定サンプルとしてください。
取扱條件
| 1.危険物第4類 第3石油類 危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法：冷凍 | |
| 危険?有害 シンボルマーク |
 |
|---|---|
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