| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) | 產(chǎn)品價(jià)格 |
| 114-01071 | KANEKA?KanCapA™ | 2mL?(net?1mL) | for?Genetic?Research | – |
| 110-01073 | KANEKA?KanCapA™ | 10mL?(net?5mL) | for?Genetic?Research | – |
| 118-01074 | KANEKA?KanCapA™ | 50mL?(net?25mL) | for?Genetic?Research | – |
新標(biāo)準(zhǔn) 抗體純化樹(shù)脂
KANEKA KanCapA™
本產(chǎn)品為Protein A親和層析樹(shù)脂。用于從活體樣本及細(xì)胞培養(yǎng)上清純化免疫球蛋白及包含F(xiàn)c段的重組抗體。
本產(chǎn)品由高交聯(lián)纖維素微珠及新研發(fā)的耐堿Protein A配體構(gòu)成，可用于IgG的親和純化。
◆特點(diǎn)
? 耐堿
? 最佳洗脫條件
? 高抗體結(jié)合能力
? 可循環(huán)使用
? 便于擴(kuò)增
◆關(guān)于改良Protein A
KanCapA™采用的不是天然Protein A，而是使用變異型C域5聚物的新型Protein A。
天然Protein A的C域結(jié)合于Fc段，也結(jié)合于Fab段，其中與VH3亞家族抗體的反應(yīng)性較高。該類型的解離需要弱酸條件下洗脫。
為改善該問(wèn)題，使用分子設(shè)計(jì)系統(tǒng)重新設(shè)計(jì)分子，研發(fā)了保持耐堿性、改善Fab段的非特異性結(jié)合及洗脫曲線的Protein A。
本產(chǎn)品采用的Protein A
|
1.C5聚體蛋白質(zhì) |
 |
最佳pH條件下清晰地洗脫抗體 |
|
2.較高的耐堿性 |
||
|
3.減少Fab段的非特異性結(jié)合 |
◆產(chǎn)品特性
KANEKA KanCapA™ 產(chǎn)品特性
|
矩陣 |
高交聯(lián)纖維 |
※ 1) 平均粒度為累積體積分布的中間粒度 2) 5%動(dòng)態(tài)結(jié)合容量為前端分析測(cè)定（停留時(shí)間3分鐘） 3) 可在強(qiáng)堿條件下清洗，但請(qǐng)避免長(zhǎng)時(shí)間的清洗 4) 請(qǐng)勿冷凍 |
|
平均粒度1) |
65-85μm |
|
|
配體 |
Protein A，重組(抗強(qiáng)堿) |
|
|
結(jié)合 |
化學(xué)結(jié)合（還原胺化） |
|
|
動(dòng)態(tài)結(jié)合容量2) |
≧35mg 人多克隆IgG／mL載體 |
|
|
化學(xué)穩(wěn)定性3) |
使用親和層析通用可溶性溶媒時(shí)較穩(wěn)定 |
|
|
pH范圍3) |
pH 2-13 |
|
|
靜止清洗條件3) |
0.1-0.5 mol/L氫氧化鈉 |
|
|
流量 |
最大500cm/h（層高: 20-25cm） |
|
|
停留時(shí)間 |
≧3分鐘（建議：4-6分鐘） |
|
|
保存條件4) |
20%乙醇渾濁液，1～10℃ |
◆應(yīng)用
1、Fab段 純化應(yīng)用
? 利用KANEKA KanCapA™的特點(diǎn)，可從經(jīng)木瓜蛋白酶處理后的IgG溶液分餾Fc段及Fab段。
2、IgG洗脫曲線（pH3.5 & pH3.0）
? 洗脫范圍已優(yōu)化，可清晰地分餾提純。
3、通過(guò)強(qiáng)堿清洗進(jìn)行樹(shù)脂循環(huán)
? 進(jìn)行300次循環(huán)處理后（0.1M氫氧化鈉溶液 15分鐘），IgG的結(jié)合容量的減少率仍低于20%，表明其循環(huán)性能較高。
|
使用0.1 M氫氧化鈉溶液進(jìn)行循環(huán)處理后的IgG結(jié)合活性曲線數(shù)據(jù) |
循環(huán)處理后（0.1M氫氧化鈉溶液 15分鐘）的IgG回收率及ProteinA配體的滲濾量的曲線數(shù)據(jù) |
4、動(dòng)態(tài)結(jié)合容量 曲線數(shù)據(jù)
? 在4-6分鐘停留時(shí)間過(guò)程中，DBC較高。
※ 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量表示純化樣本在流動(dòng)的狀態(tài)下，回收程度的數(shù)值。動(dòng)態(tài)結(jié)合容量較高的載體的流速較快，可回收大量目標(biāo)分子，因此可以認(rèn)為在短時(shí)間內(nèi)有效純化目標(biāo)分子的優(yōu)質(zhì)載體。
KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量) 曲線數(shù)據(jù)
5、不同大小的樹(shù)脂填充裝柱的壓力/流速繪圖數(shù)據(jù)
填充依賴壓力的計(jì)算方法是從整體壓力減去系統(tǒng)壓力。
6、KANEKA KanCapA™ 于各種大小的柱的填充效果
? KANEKA KanCapA™適用于各種大小的柱。
|
充填方法 |
L. D.(cm) |
高度(mm) |
培養(yǎng)皿/m |
非對(duì)稱性 |
|
流動(dòng)填充 |
4.4 |
200 |
5710 |
1.14 |
|
軸向力填充 |
7 |
199 |
6063 |
1.06 |
|
流動(dòng)填充 |
10 |
201 |
5276 |
1.18 |
|
流動(dòng)填充 |
30 |
200 |
5208 |
1.17 |
|
軸向力填充 |
45 |
233 |
4712 |
1.09 |
以下是脈沖注入數(shù)據(jù)：
可溶性溶媒：1(v/v)% 丙酮
注入量：1% 柱容量
流速：60 cm/h
參考文獻(xiàn)
使用Kaneka KanCapA純化單克隆抗體
使用該Kaneka KanCapATM從CHO細(xì)胞培養(yǎng)上清中純化單克隆抗體