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可用于iPS細胞的冷凍保存!
培養(yǎng)細胞凍存液COS banker系列
COS banker是不含血清和牛來源化合物的安全培養(yǎng)細胞凍存液。
COS banker II是為了保存過繼免疫淋巴細胞而開發(fā)的淋巴細胞凍存液。
◆特點
● 可以冷凍保存iPS細胞。
● 無需稀釋使用。
● 復蘇后的細胞存活率優(yōu)異。
● "COS banker"不含動物的血清以及其他動物源成分。*1
● 為了防止其中的DMSO腐蝕PET容器,特意采用玻璃裝瓶。
*1 "COS banker II"含有GMP級人血清白蛋白的穩(wěn)定劑。
◆實驗步驟
1. 以轉(zhuǎn)速1200rpm/5min對處于對數(shù)期*2的細胞進行離心操作,然后收集大約5×105~1×107個離心后的細胞。
2. 向細胞沉淀中添加1mL本產(chǎn)品,進行重懸后放進凍存管中,在-80°C冷凍保存。
3. 用液氮儲存時,細胞請預先在-80°C下冷凍1天以上。
4. 復蘇操作請在37°C的恒溫水浴鍋中快速進行。
*2 凍存的細胞需位于對數(shù)期,這點對于提高復蘇后的存活率至關重要。
◆規(guī)格
產(chǎn)品名稱 |
COS banker |
COS banker II |
產(chǎn)品編號 |
COS-CFM01 |
COS-CFM02 |
產(chǎn)品包裝 |
120mL |
120mL |
成分 |
含DMSO(含量不公開) |
含DMSO(含量不公開) |
儲存方法 |
低溫避光保存(2~8°C) |
低溫避光保存(2~8°C) |
有效期 |
生產(chǎn)后2年 |
生產(chǎn)后2年 |
◆質(zhì)量控制
檢查項目 |
測試方法 |
標準 |
無菌性 |
TGC、SCD以及培養(yǎng)法(日本藥典) |
不生長 |
內(nèi)毒素 |
動力學比色法(日本藥典) |
0.3 EU/mL 以下 |
細胞保存性 |
冷凍7天后重新復蘇的細胞生存 |
與對照凍存液相同 |
◆使用例子
COS banker |
iPS細胞(Dotcom)、 |
Daudi(人伯基特淋巴瘤)、HeLa S3(人宮頸癌)、 |
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K562(人慢性骨髓性白血?。aji(人伯基特淋巴瘤)、 |
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MOLT-4(人急性淋巴細胞白血病 : T- 細胞)、 |
|
CTLL-2(小鼠T : IL-2 依賴性)、NIH/3T3(小鼠胎兒)、 |
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PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)、CHO-K1(中國倉鼠卵巢)、 |
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Vero細胞(非洲綠猴腎來源細胞株)、 |
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MDCK細胞(犬腎小管上皮細胞來源的細胞株) |
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MCF-7(人乳癌) 、HepG2(人肝癌)、 |
|
P3U1(小鼠骨髓瘤)、成纖維細胞、 |
|
表皮角化細胞、血管內(nèi)皮細胞、雜交瘤、SF9(昆蟲細胞) |
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COS banker II |
人末梢血來源活化淋巴細胞、 |
Daudi細胞、Raji細胞、K652細胞、 |
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Molt-4F細胞、CTLL-2細胞、MCF-7(人乳癌)、 |
|
HepG2(人肝癌)、P3U1(小鼠骨髓瘤)、 |
|
成纖維細胞、表皮角質(zhì)形成細胞、血管內(nèi)皮細胞、 |
|
雜交瘤、CHO細胞(中國倉鼠卵巢來源細胞株)、 |
|
MDCK細胞(犬腎小管上皮細胞來源的細胞株)、HeLa(人宮頸癌)、SF9(昆蟲細胞) |
◆iPS細胞
【冷凍保存程序(緩慢凍結(jié)法)】
● 用CTK溶液回收細胞
● 離心(1000rpm,5分鐘),除去上清液
● 添加COS banker,重懸細胞
● 分裝到凍存管中
● 將凍存管放入凍存盒中。
● 置于-80℃的超低溫冰箱中
● 次日將凍存管移至液氮中
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圖1 iPS細胞(Dotcom)的凍存結(jié)果
左:復蘇后第二天、 右:復蘇后第六天
◆人淋巴細胞
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圖2 (左圖)不同細胞凍存液的細胞存活率比較
添加0.5mL細胞(活細胞濃度 3×106 cells/mL)至凍存管,并儲存在-80°C中。一周/一個月/兩個月后復蘇(在37°C恒溫水槽中孵育90秒,剩余的冷凍細胞搖晃融解),測量存活率。
灰:一周后、 藍:一個月后、 黑:2個月后
圖3(右圖)復蘇后的細胞增殖情況
復蘇凍存了一周的淋巴細胞,將各個培養(yǎng)基的活細胞濃度調(diào)至20×104cells/mL,在水浴鍋中培養(yǎng)。對第5天及第6天的活細胞進行計數(shù)。
◆產(chǎn)品列表
COS banker
不含血清和牛來源化合物的安全培養(yǎng)細胞凍存液。
產(chǎn)品編號 |
制造商 |
產(chǎn)品名稱 |
包裝 |
COS-CFM01 |
KOJ |
COS banker [Cell Freezing Medium] (chemical defined) |
120mL |
COS banker II
為了保存過繼免疫淋巴細胞而開發(fā)的淋巴細胞凍存液。
產(chǎn)品編號 |
制造商 |
產(chǎn)品名稱 |
包裝 |
COS-CFM02 |
KOJ |
COS banker II [Cell Freezing Medium] |
120mL |