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Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal
Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal
- 細(xì)胞増殖/細(xì)胞毒性測(cè)定用試薬
- 細(xì)胞機(jī)能解析
- 細(xì)胞老化
老化細(xì)胞検出キット（マイクロプレート用）
-
製品コードSG05 Cellular Senescence Plate Assay Kit – SPiDER-βGal
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 20 tests | ￥11,400 | 345-09501 |
| 100 tests | ￥33,000 | 341-09503 |
| 20 tests | SPiDER-βGal lysis Buffer Assay Buffer Stop Solution |
×1 40 ml×1 1.5 ml×1 3 ml×1 |
|---|---|---|
| 100 tests | SPiDER-βGal lysis Buffer Assay Buffer Stop Solution |
×5 100 ml×2 7.5 ml×1 15 ml×1 |
- ご購(gòu)入方法
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マニュアル
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取扱説明書
日本語(yǔ) 
-
取扱説明書 English
-
細(xì)胞數(shù)補(bǔ)正キットとの併用プロトコル 日本語(yǔ)
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Protocol for a Combined Analysis with Cell Count Normalization Kit [English]
技術(shù)情報(bào)
簡(jiǎn)便に老化細(xì)胞を數(shù)値化
準(zhǔn)備した細(xì)胞をキット同梱のBuffer で溶解し、蛍光基質(zhì)（SPiDER-βGal）を添加するだけで、SA-β-gal の活性に応じた蛍光強(qiáng)度が得られます。
なおディッシュ（100 mm dish）等で細(xì)胞を準(zhǔn)備した場(chǎng)合でも、細(xì)胞溶解後に96 ウェルプレートに移して頂くだけで評(píng)価頂けます。
実験例：薬剤?zhí)砑婴摔瑜朐u(píng)価
ROS発生剤であるDoxorubicinを添加し培養(yǎng)したWI-38 細(xì)胞を用い、本キットによるプレートアッセイを行いました。結(jié)果、Doxorubicinを添加した細(xì)胞では、 SA-β-gal の亢進(jìn)が確認(rèn)されました。
＜検出條件＞
Ex. 535 nm / Em. 580 nm
技術(shù)や使用製品に関する補(bǔ)足
本キット使用時(shí)の注意點(diǎn)：細(xì)胞數(shù)の補(bǔ)正をお?jiǎng)幛幛筏蓼埂?/b>
マイクロプレートを用いた細(xì)胞の解析では、得られる結(jié)果がウェル中の細(xì)胞數(shù)によって変化する場(chǎng)合があります。その際には、細(xì)胞數(shù)のカウントやトータルタンパク質(zhì)量の確認(rèn)により、得られた測(cè)定値の補(bǔ)正（ノーマライゼーション）が必要となります。本キットでは、試薬を細(xì)胞培養(yǎng)液に添加するだけで、細(xì)胞內(nèi)の核を染色し得られる蛍光強(qiáng)度から、細(xì)胞數(shù)を簡(jiǎn)便に評(píng)価することができます。
細(xì)胞數(shù)ノーマライゼーションキットは、
こちらから
參考文獻(xiàn)
| 文獻(xiàn)No. | 対象サンプル | 裝置 | 引用(リンク) |
|---|---|---|---|
| 1 | 細(xì)胞 (MRC-5) |
プレートリーダー | Y. Takenaka, I. Inoue, T. Nakano, M. Ikeda and Y. Kakinuma, "Prolonged disturbance of proteostasis induces cellular senescence via temporal mitochondrial dysfunction and subsequent mitochondrial accumulation in human fibroblasts", 2021, doi:10.1111/febs.16249. |
| 2 | 細(xì)胞 (ヒト網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞) |
プレートリーダー | H. Yamamoto-Imoto, S. Minami, T. Shioda, Y. Yamashita, S. Sakai, S. Maeda, T. Yamamoto, S. Oki, M. Takashima, T. Yamamuro, K. Yanagawa, R. Edahiro, M. Iwatani, M. So, A. Tokumura, T. Abe, R. Imamura, N. Nonomura, Y. Okada, D. E. Ayer, H. Ogawa, E. Hara, Y. Takabatake, Y. Isaka, S. Nakamura and T. Yoshimori, "Age-associated decline of MondoA drives cellular senescence through impaired autophagy and mitochondrial homeostasis", Cell Rep., 2022, doi:10.1016/j.celrep.2022.110444. |
よくある質(zhì)問
-
Q
1キットあたりの測(cè)定可能なサンプル數(shù)を教えてください。
-
A
測(cè)定可能なサンプル數(shù)の目安は以下の通りです。
20 tests 100 tests 測(cè)定可能なwell數(shù) 96 wellプレート
20 well分96 wellプレート
1 枚分測(cè)定可能なサンプル數(shù)
(n=3 にて測(cè)定した場(chǎng)合)6 サンプル 30 サンプル
-
Q
96 wellプレートで細(xì)胞を老化誘導(dǎo)をして測(cè)定することは可能ですか？
-
A
老化誘導(dǎo)はディッシュ等で行い、その後、細(xì)胞を96 wellプレートに移して測(cè)定することを推奨します。
同一プレート內(nèi)に老化誘導(dǎo)しない細(xì)胞（コントロール）と老化誘導(dǎo)する細(xì)胞（サンプル）を配置して比較を行いますが、96 wellプレートで老化誘導(dǎo)を行うと、（老化誘導(dǎo)の日數(shù)に依りますが）コントロール細(xì)胞は増殖しすぎてコンフルエントの狀態(tài)を招く可能性があります。
また、コンフルエントを回避するために予め細(xì)胞數(shù)を少なく播種した場(chǎng)合にも、老化誘導(dǎo)処理した老化細(xì)胞はプレートアッセイに必要な感度（細(xì)胞數(shù)）が得られない可能性があります。
-
Q
96 wellプレートに播種する細(xì)胞數(shù)の目安はどれくらいですか？
-
A
至適細(xì)胞數(shù)は細(xì)胞種によって異なります。
弊社では、1×104 cellsの WI-38細(xì)胞を各 wellに播種し、実験した実績(jī)がございます。詳しい操作については、取扱説明書內(nèi)の「実験例2」をご參照ください。
取扱條件
| 1.化審法, 2.保存方法：冷蔵,遮光 | |
| PRTR法 | 第１種指定化學(xué)物質(zhì) |
|---|---|
| 危険?有害 シンボルマーク |
    |
