DA-64

◆儲存條件

2-10℃（冷藏運(yùn)輸）

 

◆分子式

C₁₉H₂₃N₄NaO₃

◆分子量

378.39

 

◆外觀

白色~綠褐色或灰綠色，結(jié)晶性粉末~粉末（引用文獻(xiàn)：和光純藥產(chǎn)品規(guī)格）

 

◆溶解性

可溶于水（10 mg/25 mL）

以1 mM以上的濃度溶于水

 

◆產(chǎn)品概要

檢測波長

λmax（顯色波長）= 727 nm，ε/H₂O₂（一個H₂O₂分子的消光系數(shù)）=9×10⁴

分類

酶·底物·抑制劑>>酶底物>>其他底物

原理

過氧化氫是生物體中痕量組分分析、食品質(zhì)量監(jiān)控、環(huán)境物質(zhì)檢測等過程的重要中間代謝物。DA-64、DA-67是在有過氧化物酶的存在下高靈敏度地檢測出過氧化氫的水溶性氧化顯色試劑。傳統(tǒng)的水溶性過氧化氫顯色試劑由于顯色色素的分子吸光系數(shù)較低以及雖具有高靈敏度，但是因其微溶性難以處理。DA-64，DA-67首次兼容了水溶性和高靈敏度。以往，為了追求高靈敏度，不得不使用發(fā)光、熒光試劑?，F(xiàn)在，特殊的專用檢測機(jī)的檢測對象也可通過采用DA-64，DA-67，用簡便的比色計(jì)就可以獲取結(jié)果。

 

◆特點(diǎn)

兼容高靈敏度和水溶性（引用文獻(xiàn)：和光純藥情報）

◆使用例

定量H₂O₂

1.　制備顯色溶液  

把3.78 mg DA64和1 mL 100 units/mL的過氧化物酶 (Peroxidase，下文簡稱POD)放到PIPES緩沖液（0.1mol/L, pH=7, Triton X-100 0.5%）中溶解，定容至100 mL（得到DA64 100 μmol/L溶液）

2.　將上述制備的溶液3 mL與10 μL樣本溶液（H₂O₂:0~5 mmol/L）混合，并在37°C下孵育5分鐘。

3.　用分光光度計(jì)檢測727 nm處的吸光度，以空白（用蒸餾水替換樣本溶液混合成的溶液）的吸光度差作為檢測值，用單獨(dú)制備的校準(zhǔn)曲線確定樣本中的含量。

檢測POD活性

1.　制備顯色溶液

把40 mg DA64和1 mL H₂O₂（2%）放到Mcllvaine緩沖液（檸檬酸0.05 mol/L、磷酸二鈉0.1 mol/L， pH=5.7）中溶解，定容至100 mL（得到DA64 100 mmol/L溶液）

2.　將上述制備的溶液2 mL與2 mL樣本溶液（1 fmol~1 pmol/tube POD）在37°C下孵育。

3.　用分光光度計(jì)檢測727 nm處的吸光度，以減去空白的吸光度差作為檢測值，用單獨(dú)制備的校準(zhǔn)曲線確定樣本中的含量。

 

◆用途

過氧化氫比色定量（引用文獻(xiàn)：和光純藥情報）

◆產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	等級	包裝
043-22351	DA-64 N-（羧甲基氨基羰基）-4,4'-雙（二甲氨基）二苯胺鈉	生化學(xué)用	100 mg

[1]　橋爪利至:日本化學(xué)會、第60回秋季年會講演予稿集2P576 (1990)
[2]　佐方由嗣,橋爪利至,巖田勉,向井豊治:公開特許公報、昭63-24356